超氧阴离子(OFR)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。
测定原理:
超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成 NO2 -,NO2 -在对氨基苯磺酸和 α -萘胺的作用下,生成红色的偶氮化合物,在 530nm 处有特征吸收峰,根据 ΔA 值可以计算样品中 O2 -含量,反应式为 NH2OH + 2O2 - +H+ → NO2 - + H2O2 + H2O。
自备仪器和用品:
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、氯仿和蒸馏水。测定操作表:
空白管
测定管
样本(μL)
500
提取液(μL)
试剂一 (μL)
400
混匀,37℃水浴 20min
试剂二(μL)
300
试剂三(μL)
试剂四(μL)
混匀,8000g ,25℃ , 离心 5min ,小心吸取上层水相 1mL , 1mL 玻璃比色皿,蒸馏水调零,测定 A530 。 ΔA=A 测定-A 空白,空白管只要做一管。
注 意:
1、吸光值大于 2,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。
2、样品制备好之后,立刻进行测定,请勿将样品进行长时间的低温保存,以免影响测定结果。
3、试剂四有一定的毒性,请操作时做好防护措施。
上海酶联生物科技有限公司
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