产品简介
GPx是一种重要的抗氧化酶，能够清除人体内的过氧化氢等有害物质，在保护细胞免受自由基损伤，维护细胞内环境的稳定性。细胞内的脂类容易和自由基发生反应，产生脂类过氧化物。谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)还原脂类过氧化物，从而消除自由基的毒害作用。谷胱甘肽过氧化物酶几乎在所有组织中都有分布。在一些病理状况下谷胱甘肽过氧化物酶的活力会发生明显上调或下调。
绝大部分细胞内的GPx都是含硒的，且硒为该酶的活性中心组成部分。细胞内也有很少量的不含硒的GPx存在。本试剂盒检测的是最常见的含硒的GPx的含量。
产品特点
本试剂盒提供的有机过氧化物试剂（t-Bu-OOH）在没有谷胱甘肽过氧化物酶存在的情况下不会和GSH产生反应，也不会被细胞内的过氧化氢酶催化而分解。因而可以较为特异地检测出谷胱甘肽过氧化物酶的活力。
检测原理
总谷胱甘肽过氧化物酶活性测定试剂盒(DTNB法)是一种利用比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）的活性。在GSH相对比较充足并有足量有机过氧化物存在的情况下，GPx可以催化GSH生成GSSG。剩余的GSH可以和生色底物DTNB反应产生GSSG和黄色的TNB。此时，GPx活性的高低决定了剩余的GSH的量，从而决定了黄色TNB形成的量，因此TNB的形成量和GPx的活力负相关。通过测定黄色TNB的吸光度就可以计算出谷胱甘肽过氧化物酶的活性。
由于t-Bu-OOH不能被不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶所催化，所以本试剂盒可以比较特异地定量检测最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。
产品组分
产品名称 | 包装规格（100T） | 保存方式 |
样品匀浆液 | 100ml | -20℃ |
谷胱甘肽过氧化物酶检测缓冲液 | 50ml | -20℃ |
还原型谷胱甘肽(GSH) | 4.5mg | -20℃，配制成溶液，分装后-20ºC保存。 |
DTNB | 4.5mg | -20℃，配制成溶液，分装后-20ºC保存。 |
DMSO | 1.5ml | -20℃ |
过氧化物试剂(t-Bu-OOH) | 200μl | -20℃ |
96 孔酶标板 | 1 板 | RT |
96 孔覆膜 | 2 张 | RT |
保存条件
未拆封的试剂盒可在 -20℃保存12个月。
注意事项
1. 本试剂盒检测时涉及氧化还原反应，因此所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。如果在样品中的还原剂无法避免，例如DTT、巯基乙醇等，则这些还原剂的总浓度至少低于0.1mM。0.15mM的DTT可以抑制40%的酶活力。
2. 常用的Triton X-100、Tween-20等去垢剂都含有较高水平的过氧化物，会影响本试剂盒的测定。如果必须使用这些去垢剂，最好使用纯度较高并注明含较低过氧化物的去垢剂。
3. 反应体系中加入DTNB溶液后，可以在极短的时间内消耗掉剩余的GSH，使GPx催化的反应终止。因此计算酶活力时，仅使用DTNB加入之前的反应时间来进行计算即可。 样品可以立即测定，也可以-70ºC冻存待以后测定。
4. 一定要严格控制反应时的温度为25ºC，否则会引起较多误差。
5. 与NADPH法（货号BC00012）相比，本试剂盒使用的DTNB比NADPH更加稳定，操作更为简单，但NADPH法的灵敏度更高。研究人员可以根据样品中谷胱甘肽过氧化物酶的含量及实验条件进行选择。
6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
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