谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
GSH-Px 是谷胱甘肽氧化还原循环中催化还原型谷胱甘肽(GSH)氧化的主要酶之一。GSH-Px 不仅能够特异地催化还原型谷胱甘肽与 ROS 反应,生成氧化型谷胱甘肽 GSSG ,从而保护生物膜免受 ROS 的损害,维持细胞的正常功能;而且具有保护肝脏、提高机体免疫力、拮抗有害金属离子对机体的伤害和增加机体抗辐射等能力。
测定原理:
GSH-Px 催化有机过氧化物氧化 GSH ,产生 GSSG;谷胱甘肽还原酶(GR)催化 NADPH 还原GSSG,再生 GSH ,同时 NADPH 氧化生成 NADP+;NADPH 在 340 nm 有特征吸收峰,而 NADP+没有;通过测定 340 nm 光吸收减少速率来计算 GSH-Px 活性。
自备仪器和用品:
低温离心机、水浴锅、可调节移液器、酶标仪、96 孔板、和蒸馏水。
GSH-Px 测定操作:
1、酶标仪预热 30 min ,调节波长到 340 nm。
2、混合试剂在 25℃或者 37℃(哺乳动物)水浴中预热 30min。
3、混合试剂配制:临用前,在试剂二中加入试剂一 20 mL,充分震荡溶解后加入全部试剂三,混匀 。(当天用完)
4、试剂四的稀释:吸取 21.5μL 试剂四,加入 5mL 蒸馏水充分混匀,临用前配制,配制好的试剂当天使用。
5、测定管:依次在 96 孔板中加入 20μL 上清液、160μL 预热的混合试剂、20μL 稀释后的试剂四,迅速混匀后于 340nm 处测定第 30 s 和第 210s 的吸光值,分别记为 A1 和 A2 。△A 测定管= A1- A2。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
关键字: GPX 试剂盒 ; GPX ELISA KIT ; GPX ELISA试剂盒 ;
上海酶联生物科技有限公司,成立之初,获得国内外酶联免疫同行的大力支持,公司为了感恩于同行无私的帮助,特取意酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA试剂盒)的“酶联”两字,时刻铭记回报社会,公司已制定十年内,将公司打造成国内酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)行业超级航母,并且,这么多年,我们一直是为了这个愿景,坚定不移的努力奋斗着。