FITC-链霉亲和素/FITC-SA/FITC-Streptavidin/Fluorescein Isothiocyanate-Streptavidin)/绿色荧光标记生物素结合蛋白探针
组成单元:链霉亲和素为活性核心,是源自链霉菌(Streptomyces avidinii)的同源四聚体蛋白,每个亚基含 1 个生物素结合位点;FITC 为荧光标记基团,通过与链霉亲和素分子中的赖氨酸残基氨基(-NH₂)发生亲核反应(-NCS 与 - NH₂结合)实现偶联,形成稳定的硫脲键;
物理状态:常规为淡黄色至黄绿色粉末或冻干品,易吸潮,科研级产品纯度通常≥95%(SDS-PAGE 检测),生物素结合活性需≥13 U/mg(1 U 定义为结合 1 μg 生物素所需的蛋白量);
分子量:链霉亲和素四聚体分子量约 60 kDa(每个亚基约 15 kDa),标记 FITC 后分子量略有增加,标记率通常为每个四聚体结合 3-6 个 FITC 分子(D/P 值 3-6),具体因制备工艺而异。
生物素结合能力:核心优势为对生物素(Biotin)的超高亲和力,解离常数(Kd)约 10⁻¹⁵ mol/L,是已知自然界中最强的非共价相互作用之一,且结合特异性极高,不与其他生物分子非特异性结合;结合反应快速(室温下 10 分钟内完成 90% 结合),且在广泛的 pH(2.0-13.0)、温度(4-80℃)及变性剂(如尿素、盐酸胍)条件下仍能保持稳定结合,仅强还原剂(如 β- 巯基乙醇)会破坏结合活性;
溶解性:易溶于水、生理盐水及 pH 6.0-8.0 的缓冲液(如 PBS、Tris-HCl),溶解度可达 10 mg/mL 以上,溶解后溶液澄清无沉淀;不溶于有机溶剂(如乙醇、甲醇、丙酮),在高盐溶液(如 2 mol/L NaCl)中仍保持良好溶解性;
免疫原性:天然链霉亲和素免疫原性较低(相较于亲和素),经 FITC 标记后免疫原性略有增强,但在常规检测浓度下(0.1-10 μg/mL)极少引发非特异性免疫反应。
储存稳定性:冻干品在 - 20℃避光、密封、干燥条件下可稳定保存 24-36 个月;溶解后(浓度 0.1-1 mg/mL,PBS 缓冲液)在 4℃避光条件下可保存 1-2 周,酶活性与荧光强度下降≤5%;反复冻融(≥3 次)会导致蛋白聚集,生物素结合活性下降≥30%,荧光信号淬灭明显;
环境稳定性:强光(尤其是紫外光)会导致 FITC 荧光淬灭(24 小时光照后荧光强度下降≥40%);高温(>60℃)会使蛋白变性(65℃处理 30 分钟后活性丧失≥80%);极端 pH(pH<4.0 或 pH>10.0)会破坏四聚体结构,导致生物素结合位点失活,但中性条件下对蛋白酶(如胰蛋白酶、胃蛋白酶)耐受性较强。
相关产品:
FITC-琥珀酸,FITC-Succinicacid
FITC-尿素酶,FITC-Urease
FITC-链霉亲和素,FITC-SA,FITC-Streptavidin
Cy7-乙醇胺磷酸酯,CY7-O-Phosphorylethanolamine
HRP-FITC
FITC-尼拉帕尼,FITC-Niraparib
CY5-TSA,CY5-酪氨酰胺
陕西星贝爱科生物科技有限责任公司
联系商家时请提及chemicalbook,有助于交易顺利完成!
星贝爱科生物