脂质过氧化物(LPO)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
脂质过氧化是动植物体内活性氧(ROS)氧化生物膜的过程,脂质过氧化物(LPO)是脂质过氧化过程的产物,即 ROS 与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成 LPO,使细胞膜的流动性和通透性发生改变,最终导致细胞结构和功能的改变。因此,LPO 常被作为机体氧化应激的一种指标,与某些疾病的病理过程,如肿瘤、化学中毒、感染、炎 症、自身免疫疾病、动脉粥样硬化(AS)及心脑血管疾病,以及衰老等生理过程密切相关。
测定原理:
LPO 在酸性条件下加热,产生小分子终产物 MDA ,MDA 与硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid ,TBA)缩合,生成红色产物,在 535nm 有最大吸收峰。
自备仪器和用品:
分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水测定步骤:
在 EP 管中依次加入如下试剂
测定管
对照管
试剂一 (µL)
900
样本(µL)
90
蒸馏水(µL)
试剂二(µL)
300
立即混匀,95℃水浴 40min 后,流水冷却。3000g 离心 10min,吸取 1mL 上清加入 1mL 玻璃比色皿,测定 535nm 下各管吸光值,记作 A 测定和 A 空白。 A=A 测定-A 空白。
注 意:
临用前注意试剂二是否完全溶解,如未溶解,可以 70℃-90℃加热,并振荡以促进溶解。
上海酶联生物科技有限公司
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