鸟氨酸转氨酶(OAT)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
脯氨酸是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中脯氨酸代谢因其初始底物不同,分为谷氨酸( Glu) 和鸟氨酸( Orn) 两条合成途径。鸟氨酸转氨酶( δ-OAT) 是 是以鸟氨酸为前体合成脯氨酸途径的关键酶,对植物适应逆境胁迫起关键作用。
测定原理:
鸟氨酸和α-酮戊二酸在鸟氨酸转氨酶和 NADH 作用下发生氨基转移反应生成吡咯啉-5-羧酸(P5C),同时产生 NAD ,通过检测 340nm 处的吸光度的变化可反映出鸟氨酸转氨酶活性的高低。
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、研钵、紫外可见分光光度计、1mL 石英比色皿测定操作:
1. 分光光度计预热 30min ,调节波长至 340nm。
2. 将配好的试剂二、三、四 37℃预热 5min。(注意:粉剂试剂需要自行配制)
3. 取 1mL 石英比色皿,依次加入 300μL 试剂二,300μ L 试剂三,300μ L 试剂四,100μL 粗酶液,充分混匀,记录 340nm 处初始吸光值和 37℃反应 10min 的吸光值 A2,△A=A1-A2。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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