华支睾吸虫 (CS)检测试剂盒(荧光PCR法)
试剂简介:
华支睾吸虫 (CS) 检测试剂盒(荧光PCR法) 是一种用于快速、灵敏检测华支睾吸虫核酸的分子诊断工具,广泛应用于临床诊断、流行病学调查及食品安全监测。
产品名称 | 华支睾吸虫 (CS)检测试剂盒(荧光PCR法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1331 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
检测原理
试剂盒采用TaqMan探针法或SYBR Green荧光染料实时PCR技术,针对华支睾吸虫的特异性基因序列(如线粒体cox1基因或ITS2序列)设计引物和探针,
通过荧光信号实时监测PCR扩增过程,实现对华支睾吸虫DNA的定性或定量检测。
产品组成
PCR反应液:含缓冲液、dNTPs、Mg2?等PCR反应必需成分。
酶混合液:含高保真DNA聚合酶、热启动Taq酶等。
特异性引物和探针:针对华支睾吸虫基因组保守区域设计,探针标记荧光报告基团(如FAM)和淬灭基团。
阳性对照:含已知浓度的华支睾吸虫DNA,用于验证试剂盒有效性。
阴性对照:不含目标基因,用于排除假阳性。
操作步骤
样品采集与处理:采集粪便、胆汁或淡水鱼样本,提取总DNA。
试剂配制:根据待检样本数量,配制PCR反应混合液,每反应包含适量反应液、酶液、引物和探针。
加样:将提取的核酸、阳性对照和阴性对照加入反应管中,盖紧管盖。
PCR扩增:将反应管置于荧光定量PCR仪中,设置扩增程序(如95℃预变性,随后进行40个循环的变性、退火和延伸),并实时监测荧光信号。
结果分析:根据Ct值(循环阈值)判断结果,Ct值越小表示病毒载量越高。阳性对照应有典型S型扩增曲线,阴性对照应无扩增曲线。
操作特点
高灵敏度和特异性:能够检测低浓度的华支睾吸虫DNA,特异性引物和探针设计可有效区分华支睾吸虫与其他寄生虫或病原体。
快速检测:整个检测过程通常在2-3小时内完成,大大缩短了传统镜检法所需的时间。
定量分析:通过标准曲线法,可以对样本中的华支睾吸虫DNA进行定量分析,有助于评估感染程度。
操作简便:试剂盒提供了一站式的检测解决方案,操作步骤简单,易于标准化和自动化。
注意事项
严格分区操作:为避免交叉污染,应将实验分为试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区。
防污染措施:所有操作需戴一次性手套,使用带滤芯吸头,实验结束后彻底清洁工作台。
试剂保存:试剂盒组分应按照说明书要求保存,通常需要避光、低温保存,避免反复冻融。
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