葡萄糖脱氢酶(GCDH)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
GCDH(EC 1.1.1.47)催化D-葡萄糖和NAD(P)生成D-葡萄糖酸和NAD(P)H ,大量存在于高等动物的肝脏和弱氧化醋杆菌中。在低聚果糖生产中使用GCDH,不仅能去除低聚果糖中的葡萄糖提高低聚果糖的含量,而且生成的葡萄糖酸与钙离子结合生成的葡萄糖酸钙是一种理想的补钙制剂。因而,GCDH已成为制备高含量低聚果糖的理想用酶。
测定原理:
GCDH 催化 D-葡萄糖和 NAD 生成 D-葡萄糖酸和 NADH ,在 340nm 下测定 NADH 上升速率,即可反映GCDH 活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零;2 、 工作液的配制:临用前将试剂二转移到试剂一中混合溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
3 、 将工作液置于 37℃预热 5 分钟。4 、 在 1mL 石英比色皿中加入 50μL 样本和 950μL 工作液,立即混匀,记录 340nm 处初始吸光值 A1 和1min 后的吸光值 A2 ,计算 ΔA=A2-A1。
注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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