总蛋白定量(TP)测定试剂盒/比色法100管/96样
测定原理:
碱性条件下,蛋白将 Cu2+还原为 Cu+ , Cu+与 BCA 试剂形成紫色的络合物,562nm 处有最大吸收峰,依据吸光度与浓度成正比,通过测吸光度即可计算待测蛋白的浓度。试剂组成及配制:
试剂一:粉剂×2 支,稀释液,12.5ml ×2 瓶,4℃冷藏密封保存 6 个月。
试剂一应用液的配制:取试剂一粉剂 1 支与试剂一稀释液 1 瓶混匀,溶解完全后 4℃待用。
试剂二:250 μl ×2 支,4℃冷藏密封保存 6 个月。
工作液的配制:按试剂一应用液:试剂二=50 ∶ 1 的比例配制,混匀后待用,用多少配多少。试剂三:终止剂贮备液 20ml ×1 瓶,4℃冷藏密封保存 6 个月。终止剂应用液:取终止剂贮备液用双蒸水5 倍稀释后备用,4℃冷藏。试剂四:524μg/ml 蛋白标准液 0.2ml ×1 支。4℃保存 1 个月。样本前处理:详见试剂盒内说明书关于样本处理的说明。
操作步骤:
空白管
标准管
测定管
双蒸水(μl)
20
524μg/ml 标准品(μl)
待测样本(μl)
工作液(μl)
250
漩涡混匀,37℃孵育 30 分钟
终止剂应用液(μl)
750
漩涡混匀,静置 5 分钟,562nm 波长,0.5cm 光径,双蒸水调零,测定各管吸光度值
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