总蛋白定量(TP)测定试剂盒/微板法96样
测定原理:
蛋白质分子具有-NH3+基团,当棕红色的考马斯亮蓝显色剂加入蛋白标准液或样品中时,考马斯亮蓝染料上的阴离子与蛋白-NH3+结合,使溶液变为蓝色,通过测定吸光度可计算出蛋白含量。试剂及配制
试剂一:考马斯亮蓝贮备液:30ml×1 瓶,4℃保存 6 个月。考马斯亮蓝显色液的配制:按考马斯亮蓝贮备液:双蒸水=1 ︰ 4 的比例进行配制(即 5 倍稀释),用多少配多少,现用现配。试剂二:蛋白标准品 0.5ml×1 支,4℃保存 1 个月。试剂一:考马斯亮蓝贮备液,60ml×1 瓶,4℃保存 6 个月。考马斯亮蓝显色液的配制:按考马斯亮蓝贮备液:双蒸水=1 ︰ 4 的比例进行配制(即 5 倍稀释),用多少配多少,现用现配。试剂二:蛋白标准品 0.5ml×1 支,4℃保存 1 个月。
试剂及配制
试剂一:考马斯亮蓝贮备液,60ml×1 瓶,4℃保存 6 个月。考马斯亮蓝显色液的配制:按考马斯亮蓝贮备液:双蒸水=1︰ 4 的比例进行配制(即 5 倍稀释),用多少配多少,现用现配。
试剂二:蛋白标准品 0.5ml×1 支,4℃保存1个月。操作步骤:
空白管
标准管
测定管
双蒸水(ml)
0.05
蛋白标准品( ml)
样品( ml)
考马斯亮蓝显色液(ml)
3.0
混匀,静置 10 分钟,于 595nm 处,1cm 光径,双蒸水调零,测各管 OD 值。
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