产品信息:

NCI-H1299/LUC (STR) 细胞是一种经过荧光素酶(Luciferase)基因转染的人非小细胞肺癌细胞系,常用于肿瘤生物学研究,特别是体内成像和肿瘤生长监测。以下是其详细说明、培养操作及特性:
产品名称 | 人非小细胞肺癌细胞带荧光素酶;NCI-H1299/LUC (STR) | 英文名称 | NCI-H1299/LUC:NCIH1299LUC |
货号 | AXB10026 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
细胞背景
来源:NCI-H1299细胞源自人非小细胞肺癌(NSCLC),LUC表示该细胞系经过荧光素酶基因转染,可用于生物发光成像(BLI)。
应用:常用于肿瘤生长、转移及治疗反应的体内研究,通过荧光素酶报告基因实现实时监测
2. 细胞特性
形态:上皮样细胞,贴壁生长。
生长特性:倍增时间约为22-30小时,需在适宜条件下维持指数生长。
荧光素酶表达:可在加入底物D-荧光素后发出生物荧光,便于活体成像。
3. 培养操作
培养基
推荐使用含10%胎牛血清(FBS)、1%抗生素(如青霉素/链霉素)的RPMI 1640培养基
培养条件
温度:37℃。
气体环境:5% CO、95%空气的湿润培养箱。
传代步骤
观察细胞:当细胞汇合度达到80%-90%时进行传代。
移除旧培养基:轻轻吸出旧培养基,用PBS清洗细胞一次。
消化细胞:加入适量胰酶-EDTA溶液,37℃孵育至细胞脱落(通常1-2分钟)。
终止消化:加入含血清的培养基终止胰酶作用,轻轻吹打使细胞悬浮。
分装细胞:将细胞悬液按适当比例分装到新培养瓶中,补加新鲜培养基。
继续培养:置于培养箱中继续培养,定期观察细胞状态。
冻存与复苏
冻存:使用含10% DMSO和90% FBS的冻存液,分装至冻存管中,逐步降温后存于液氮罐或-80℃冰箱。
复苏:从液氮中取出冻存管,迅速投入37℃水浴中融化,随后转移至含预热培养基的培养瓶中,轻轻混匀后放入培养箱。
4. 注意事项
无菌操作:全程需在超净工作台中进行,避免污染。
定期检测:建议定期进行支原体检测和STR鉴定,确保细胞系的纯度和身份。
荧光素酶检测:进行生物发光成像前,需加入适量D-荧光素底物,并在避光条件下进行检测。
培养操作要点:

基础培养基选择:分为天然培养基、合成培养基(如DMEM、RPMI 1640)和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置:
温度:多数人和哺乳动物细胞为36-37℃,昆虫细胞为27℃。
pH值:多数哺乳动物细胞为7.4,昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度:通常维持5-7% CO₂,多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压:控制在260-320mOsm/kg为宜。
功能特点

通过被动运输和主动运输实现物质跨膜转运;以ATP为核心载体,通过线粒体氧化磷酸化或叶绿体光合磷酸化途径供能;通过受体-第二信使-效应器的级联反应模式进行信号转导;原核细胞采用二分裂,真核细胞则通过有丝分裂、减数分裂等方式繁殖;细胞可进行程序性死亡(凋亡),并在多细胞生物中实现分化形成不同组织
注意事项与应用
无菌操作:必须严格无菌无毒,避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。
营养需求:需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等,动物细胞还需血清。
抗生素使用:可添加双抗或三抗预防污染,但长期培养不建议持续使用,以防产生耐药性。
细胞培养技术是生物医学研究的基础工具,可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。
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关键字: NCI-H1299/LUC;人非小细胞肺癌细胞带荧光素酶;贴壁细胞;
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