细胞色素b5含量测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
胞色素 P450 酶是一组主要存在于肝脏的同工酶,在外源物质代谢中具有重要作用,尤其是药物和毒物的代谢。细胞色素 P450 和细胞色素b5 是 P450 酶系的两个血红素蛋白,其比值的变化与 P450 代谢活性密切相关。
测定原理:
氧化型细胞色素 b5 经连二亚硫酸钠还原后,在 424nm 处有最大吸收峰,通过测定 424nm 和 490nm 处吸光值的差异,即可计算出细胞色素 b5 的含量。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、普通离心机,超速离心机、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。细胞色素 b5 含量测定操作:1. 分光光度计预热 30 min。
2. 工作液置于 25℃水浴中预热 30 min。
3. 空白管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 μ L 蒸馏水,1000μ L 工作液,室温静置 2 min ,424nm 和 490nm处吸光值,424nm 处吸光值记为 A 空白管 1,490nm 处吸光值记为 A 空白管 2。△A 空白管=A 空白管 1- A空白管 2
4. 测定管:取 1mL 玻璃比色皿,加入 50 μ L 待测液,1000μ L 工作液,室温静置 2 min ,424nm 和 490nm处吸光值,424nm 处吸光值记为 A 测定管 1,490nm 处吸光值记为 A 测定管 2。△A 测定管=A 测定管 1- A测定管 2。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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