多酚氧化酶(PPO)测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
PPO(EC1.10.3.1)主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是一种含铜的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化产生醌,从而引起褐化,与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。
测定原理:
PPO 能够催化邻苯二酚产生醌,后者在 525nm 有特征光吸收。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。测定操作表:样本测定(在 EP 管中依次加入下列试剂)
样本
180
煮沸的样本
试剂一
720
试剂二
蒸馏水
37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)中准确水浴 10min 后,95℃水浴 5min充分混匀,10000g,25℃离心 10min ,取上清,525nm 处检测测定管和对照管吸光度。ΔA=A 测定管-A 对照管。
注 意:
煮沸样本的操作:取 300μL 离心上清于 EP 管中,进行 5min95℃水浴处理;每个测定管需要设一个对照管,可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行 5min95℃水浴处理。
上海酶联生物科技有限公司
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