果胶酶测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
果胶酶(pectinase)是一类分解果胶质酶类的总称,包括原果胶酶,果胶酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶四大类,广泛存在于植物果实和微生物中,主要用于食品、酿酒、环保、医药、纺织及日化用品行业。
测定原理:
果胶酶水解果胶生成半乳糖醛酸,具有还原性醛基,与 DNS 试剂反应生成红棕色物质,在 540nm 有特征吸收峰,测定 540nm 处吸光值变化可计算得果胶酶活性。
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。测定操作表:
对照管
测定管
试剂二(µL)
400
50℃水浴温育 5min
样本(µL)
100
煮沸样本(µL)
混匀,50℃水浴反应 30min
试剂三(µL)
500
沸水浴 5min,冰浴冷却终止反应,8000g ,4℃, 离心 10min,取上清,蒸馏水调零, 1mL 玻璃比色皿测定 540nm 处吸光值 A,△A=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。
注 意:
1、试剂二若有沉淀析出,请置于 50℃加热溶解。
2、测定之前请先做预实验,如果吸光值较高或较低,请用提取液做适当的稀释或者加大样本量,并在计算公式中乘以稀释倍数或者以实际加入的样本体积参与计算。
3、煮沸样本建议在沸水中煮沸 10 分钟,以将酶彻底灭活。
上海酶联生物科技有限公司
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