肌酸激酶(CK)测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与 ATP 之间的转磷酰基反应,在能量运转、肌肉收缩和 ATP 再生中有重要作用,是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。
测定原理:
CK 催化磷酸肌酸和 ADP 生成肌酸和 ATP,己糖激酶催化 ATP 与葡萄糖形成 6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化 6-磷酸葡萄糖与 NADP+生成 NADPH ,导致 340nm 光吸收值增加。
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、恒温水浴锅、酶标仪、96 孔板和蒸馏。测定操作表:
1. 酶标仪预热 30min ,调节波长至 340nm。
2. 在 96 孔板中加入 40μL 样本和 60μL 蒸馏水,最后加入 100μL 工作液,立即混匀,37℃下测定初始吸光值 A1 与 1min 后的吸光值 A2 ,ΔA =A2-A1。
注 意:
1. 配制好的工作液 4℃稳定 7 天,请配制后尽快使用。
2. 血清的 CK 不稳定,采集样本后尽快测定,4℃避光保存可稳定24h。
3. 样品蛋白质含量需要另外测定,可选用 BCA 蛋白含量测定试剂盒进行测定。
4. OD 值大于 0.5 可用提取液适当稀释样品,并在计算公式中相应的改变稀释倍数。
上海酶联生物科技有限公司
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