3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测定试剂盒/微量法/96S

3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测定试剂盒/微量法/96S

测定意义：

3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的关键酶，广泛存在于动植物和微生物体内，催化 1，3-二磷酸甘油酸转变为 3-磷酸甘油酸，产生 1  分子 ATP ，具有影响 DNA   复制和修补及刺激病毒 RNA  合成等生物学功能，广泛应用于药物靶标设计。

测定原理：

3-磷酸甘油酸激酶催化 3-磷酸甘油酸和 ATP  产生 1,3-二磷酸甘油酸和 ADP ，1,3-二磷酸甘油酸在 3-磷酸甘油醛脱氢酶和 NADH  作用下产生 3-磷酸甘油醛、NAD  和磷酸，340nm   处的吸光度变化反映了 3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。

自备实验用品及仪器：

天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96  孔板。

测定操作：
1. 分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。

2. 取微量石英比色皿/96 孔板，依次加入 100 μ L 试剂一，20 μ L 试剂二，10 μ L 试剂三，10μL 试剂四， 40 μ L 试剂五，20 μ L 粗酶液，充分混匀，记录 340nm 处 10s 的吸光值 A1 和 310s 的吸光值 A2，△ A=A1-A2。

注 意：

正式测定之前选择 2-3  个预期差异大的样本做预测定。