硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测定试剂盒/微量法/96S 新品

硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)测定试剂盒/微量法/96S

测定意义：

TrxR 是一种 NADPH 依赖的包含 FAD 结构域的二聚体硒酶，属于吡啶核苷酸-二硫化物氧化还原酶家族成员，与硫氧还蛋白以及 NADPH 共同构成了硫氧还蛋白系统。TrxR 与GR 活性类似，催化 GSSG 还原生成GSH，是谷胱甘肽氧化还原循环关键酶之一。

测定原理：

TrxR 催化 NADPH 还原 DTNB 生成 TNB 和 NADP+，TNB 在 412 nm 有特征吸收峰，通过测定 412nm 波长处 TNB 的增加速率，即可计算 TrxR 活性。

自备仪器和用品：

低温离心机、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、和蒸馏水。

TrxR 测定操作：
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min ，调节波长到 412nm，用蒸馏水调零。

2. 试剂一在 25℃（一般物种）或者 37℃（哺乳动物）预热 30min。

3. 空白管：取微量玻璃比色皿或 96 孔板，加入 20μL 试剂二，20μL 试剂三，160μL 试剂一，迅速混匀后于 412 nm 测定 10 s 和 310 s 吸光度，记为 A1 和 A2 。△A 空白管=A2-A1。

4. 测定管：取微量玻璃比色皿或 96 孔板，加入 20μL 试剂二，20μL 试剂三，140μL 试剂一，20μL 上清液，迅速混匀后于 412 nm 测定 10 s 和 310 s 吸光度，记为 A3 和 A4。△A 测定管=A4-A3。

注 意：

空白管只需测定一次。