还原型谷胱甘肽(GSH)测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
GSH 是细胞内最主要的抗氧化巯基物质,在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值(GSH/GSSG)是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此,测定细胞内 GSH 和 GSSG含量以及 GSH/GSSG 比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
测定原理:
DTNB 与 GSH 反应生成复合物,在 412nm 处有特征吸收峰;其吸光度与 GSH 含量成正比。
自备仪器和用品:
低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、和蒸馏水。GSH 测定操作:1. 分光光度计/酶标仪预热30min ,调节波长到 412 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二置于 25℃(一般物种)或者 37℃(哺乳动物)水浴中保温 30min。
3. 空白管:取微量玻璃比色皿或 96 孔板,依次加入 20μL 蒸馏水,140μL 试剂二,40μL 试剂三,混匀静置 2min 后测定 412 nm 吸光度 A1。
4. 测定管:取微量玻璃比色皿或 96 孔板,依次加入 20μL 上清液,140μL 试剂二,40μL 试剂三,混匀静置 2min 后测定 412 nm 吸光度 A2。
注 意:空白管只需要测定一次。
上海酶联生物科技有限公司
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