单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)测定试剂盒/分光光度法/48样
测定意义:
MDHAR 催化 MDHA 还原生成 AsA,在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。
测定原理:
MDHAR 催化 NADH 还原 MDHA 生成 AsA 和 NAD+ ,NADH 在 340 nm 有特征吸收峰,但是 NAD+没有。通过测定 340 nm光吸收下降速率, 来计算出 MDHAR 活性。
实验中所需仪器及设备:
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水。MDHAR 测定操作:1. 分光光度计预热 30 min ,调节波长到 340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在 25℃水浴锅中预热 30 min。
3. 依次在比色皿中加入 100μL 试剂三、100μL 试剂四、100μL 试剂五和 600μL 试剂二,最后加入 100μL 上清液,迅速混匀后于 340nm 比色,记录 30s 和 150s 的吸光值 A1 和 A2 ,△A=A1-A2。
注 意:临用前配制的试剂未使用完的 4℃保存,3 天内使用完。
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