羟自由基(OH.-)分光法测定试剂盒/48样
测定原理:
Fenton 反应是最常见的产生羟自由基的化学反应,H2O2 的量和 Fenton 反应产生的 OH ·量成正比,当给予电子受体后,用 griess 试剂显色,形成红色物质,其呈色与 OH · 的多少成正比关系。
操作表:
以上配制好的应用液,先在 37℃水浴中预温 3 分种,以下操作在 37℃水浴中进行。
空白管
标准管
对照管
测定管
双蒸水( ml)
0.4
0.2
0.03% H2O2 标准应用液( ml)
底物应用液( ml)
样本*( ml)
试剂三应用液( ml)
混匀,37℃反应 1 分钟(准确以秒表计时),从加完试剂三开始到一分钟结束,立即加
入显色剂终止反应,一次只能做一只管子。
注 意:
1 、必须每一只管子单独做,并且反应时间一分钟一定要准确。
2 、必须严格按照操作表顺序加试剂,不可配制混合试剂。
3 、检测样本溶剂或介质可为生理盐水、双蒸水、醋酸、无水乙醇,但不能为磷酸缓冲液。
4 、此法检测灵敏度较高,检测血清(浆)和组织以外样本时,最好先取原液及不同浓度稀释后的样本,例如 5 倍稀释液或 10 倍稀释液做预试。如测定管颜色太浅可将样本用其溶剂继续稀释至颜色较深为止。我所曾检测花粉的水提液的羟自由基,将其原液稀释 150
倍后,显色较好。
上海酶联生物科技有限公司
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