商品属性
产品名称 | 大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 | 英文名称 | RatEPO elisa kit |
检测范围 | 93.75pg/mL-6000pg/mL | 货号 | PR9687 |
预期用途:本试剂盒用于体外定量检测大鼠血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养上清液或其他相关生物液体中的EPO含量,仅限研究使用,不适用于临床诊断。
实验原理
采用双抗体夹心法检测EPO浓度。将纯化的抗EPO抗体包被于微孔板形成固相载体,依次加入待测样本或标准品、生物素化抗EPO抗体及HRP标记的亲和素。经洗涤后,加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶催化下转化为蓝色产物,酸性终止液作用后转为黄色。颜色深度与样本中EPO浓度呈正相关,通过450 nm波长测定吸光度(OD值),依据标准曲线计算浓度。
试剂盒组成
48孔配置:微孔板(包被抗体)、标准品(120 mU/mL)、生物素化抗体、HRP标记亲和素、TMB显色液、终止液、洗涤缓冲液、封板膜、密封袋、说明书。
96孔配置:组分同上,数量按比例增加。
标准品配制:临用前15分钟内将原液(120 mU/mL)用样品稀释液进行倍比稀释,浓度梯度为120、60、30、15、7.5、3.75、1.87 mU/mL,稀释液作为0 mU/mL空白对照。


操作步骤
加样:向微孔板中加入标准品或样本,每孔100 μL。
孵育:37℃孵育90分钟,洗涤去除未结合物。
加生物素化抗体:每孔加入100 μL,37℃孵育60分钟后洗涤。
加酶结合物:加入HRP标记亲和素,37℃避光孵育30分钟,洗涤。
显色:每孔加入TMB底物90 μL,避光反应15-30分钟。
终止与检测:加入50 μL终止液,立即于450 nm读取OD值。
注意事项
避免反复冻融标准品或样本。
洗涤时需彻底清除孔内残留液体,避免交叉污染。
显色时间需严格控制,终止后10分钟内完成检测。
不同批次试剂组分不可混用。
保存条件:未开封试剂盒2-8℃保存,开封后按组分要求存放(部分需-20℃避光保存)。
有效期:详见包装标签。
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