商品属性
产品名称 | 大鼠促红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Rat EPO ELISA Kit |
检测范围 | 125pg/mL-4000pg/mL | 货号 | PR33352 |
产品基本信息
规格：96孔/板（可适配48孔配置）
检测方法：双抗体夹心酶联免疫吸附法（ABC-ELISA）
用途：定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清液、细胞裂解液等样本中的EPO含量，仅限科研使用，不可用于临床诊断。
保存条件：2-8℃冷藏，有效期6个月。
检测原理
采用双抗体夹心法：
包被：微孔板预包被抗大鼠EPO单克隆抗体。
结合：样本中的EPO与固相抗体结合后，加入生物素标记的抗大鼠EPO二抗，形成“抗体-抗原-二抗”复合物。
显色：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，催化底物TMB显色（蓝色→黄色），颜色深度与EPO浓度正相关。
测定：酶标仪在450 nm波长下检测吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。
样本处理要求
血清：室温静置2小时或4℃过夜后，1000×g离心20分钟，取上清；-20℃保存时避免反复冻融。
血浆：EDTA或肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃下1000×g离心15分钟，分离上清。
细胞培养上清：离心后直接取上清，-20℃保存。
细胞裂解液：PBS洗涤细胞3次，-20℃反复冻融3次或使用裂解液，600×g离心10分钟取上清。
标准品配制
原液浓度：120 mU/mL，临用前15分钟内稀释为系列梯度（60、30、15、7.5、3.75、1.87 mU/mL），样品稀释液作为0 mU/mL空白对照。
稀释方法：例如配制60 mU/mL标准品，取0.5 mL原液加0.5 mL稀释液混匀，其余梯度依此类推。
操作步骤概要
加样：每孔加入100 μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。
洗涤：弃液后拍干，加入洗涤液清洗3次。
加二抗：每孔加入生物素化抗体，37℃孵育60分钟。
加酶结合物：加入HRP标记亲和素，37℃避光孵育30分钟。
显色：加入TMB底物，避光反应15-30分钟，终止后测定OD值。
注意事项
试剂使用前需平衡至室温，避免反复冻融。
不同批次试剂组分不可混用。
显色时间需严格控制，避免过度反应。
实验废弃物需按生物危害品规范处理。
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关键字： 大鼠促红细胞生成素;EPO;ELISA试剂盒;