商品属性
产品名称 | 人肠道病毒71型抗体(IgM)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human IgM ELISA Kit |
检测范围 |
| 货号 | PH33472 |
用途：本试剂盒用于定性或定量检测人血清、血浆等样本中肠道病毒71型（EV71）特异性IgM抗体，适用于科研用途，不可用于临床诊断。
实验原理
采用捕获法ELISA原理：
微孔板预包被抗人IgM抗体（μ链捕获抗体），用于结合样本中的IgM。
加入待测样本后，样本中的EV71 IgM抗体被固相抗体捕获。
加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的EV71特异性抗原，形成“抗IgM抗体-IgM-EV71抗原-HRP”复合物。
经洗涤去除未结合物，加入TMB底物显色，颜色深浅与EV71 IgM抗体浓度正相关。
终止反应后，于450 nm波长测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算抗体浓度。
试剂盒组成
预包被微孔板：96孔（或48孔），抗人IgM抗体包被。
EV71抗原-HRP结合物：1瓶（体积依规格而定）。
阳性/阴性对照：各1管。
样本稀释液：1瓶。
浓缩洗涤液（20×）：需按比例稀释。
TMB显色液A/B：各1瓶。
终止液（2M硫酸）：1瓶。
封板膜、说明书：各1份。
样本要求
类型：血清（推荐）、血浆（避免使用肝素抗凝）。
处理：样本需离心去除颗粒物，避免反复冻融。
保存：2–8℃可保存3天，-20℃长期保存。
操作步骤
试剂准备：洗涤液按1:19稀释，样本按说明书稀释。
加样：每孔加入100 μL标准品或样本，37℃孵育30分钟。
洗涤：弃液后拍干，重复洗涤5次。
加酶标物：每孔加入HRP标记抗原，37℃孵育30分钟。
显色：加入TMB避光反应15分钟，终止后30分钟内检测。
结果判读
定性分析：样本OD值≥临界值（阴性对照均值×2.1）判为阳性。
定量分析：以标准品浓度对数与OD值对数绘制曲线，计算样本浓度。
性能参数
灵敏度：≤5 U/mL。
特异性：与柯萨奇病毒等常见肠道病毒无交叉反应。
批内/批间变异系数（CV）：均<10%。
注意事项
试剂盒保存于2–8℃，使用前平衡至室温。
避免溶血、脂血或污染样本。
终止液具腐蚀性，需谨慎操作。
有效期6个月，开封后建议1个月内使用完毕。
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