产品编号：D054003A
英文名：(4R,6S)-Dorzolamide EP Impurity B (Hydrochloride)
英文别名：(+/-)-(4R,6S)-4-(ethylamino)-6-methyl-5,6-dihydro-4H-thieno [2,3-b] thiopyran-2-sulfonamide 7,7-dioxide hydrochloride（注：核心结构为 (4R,6S) 手性构型的噻吩并噻喃母核，含乙氨基、甲基、磺酰胺基及 7,7 - 二氧化物基团，是多佐胺（碳酸酐酶抑制剂）合成中手性控制偏差或氧化反应副生成的 EP 规定杂质，以盐酸盐形式存在，区别于多佐胺的特定取代侧链结构）
CAS 号：120279-37-0
分子式：C10H16N2O4S3.HCl
分子量：324.44（游离碱）+ 36.46（HCl）= 360.90（盐酸盐整体分子量）
手性构型专属与纯度双优：纯度经手性 HPLC 与 LC-MS/MS 双重验证，明确含 (4R,6S) 手性构型、噻吩并噻喃 - 7,7 - 二氧化物母核、乙氨基及磺酰胺基特征结构，与多佐胺主峰（取代侧链差异）差异显著，可作为手性 / 氧化副反应杂质的专属对照，避免与去乙氨基多佐胺、脱磺酰胺杂质等交叉干扰，确保定性定量结果精准。
稳定性适配眼科药物检测场景：在避光、干燥、常温（15-25℃）储存条件下，噻吩并噻喃母核的二氧化物结构、磺酰胺键及盐酸盐形式稳定，无明显水解、脱盐或氧化分解迹象，能保障多批次检测数据的重复性与准确性，适配多佐胺原料药及滴眼液的长期质量监控需求。
溶解性与分离性能优异：分子因盐酸盐形式及磺酰胺基、氨基的极性，易溶于水、甲醇等极性溶剂，也可溶于乙腈 - 水混合溶剂；通过手性 HPLC（如 Chiralpak AD-H 柱），以乙腈 - 含 0.1% 三氟乙酸的水相梯度洗脱，能与多佐胺主峰及制剂辅料（如氯化钠、苯扎氯铵）实现基线分离，检测限可达 μg 级，满足 EP 规定杂质常规监控需求。
核心杂质监控场景：用于多佐胺原料药及滴眼液的质量控制，重点监测 (4R,6S) 构型的氧化 - 手性杂质含量 —— 作为碳酸酐酶抑制剂（治疗开角型青光眼、高眼压症），多佐胺需符合 EP（欧洲药典）对特定杂质的限量要求，该杂质无明显碳酸酐酶抑制活性，精准检测可避免因超标影响药效（稀释活性成分浓度）或增加眼部刺激风险（如异物感、流泪）。
合成工艺优化参照：辅助排查杂质生成源头，例如多佐胺合成中 “噻吩并噻喃环氧化” 步骤氧化剂（如过氧乙酸）过量导致过度氧化、“4 位氨基乙基化” 手性催化剂选择性不足生成 (4R,6S) 构型、成盐过程盐酸过量诱发副反应等问题，通过控制氧化剂用量、选用高选择性手性催化剂、优化盐酸成盐参数，减少该杂质的生成量。
检测方法开发与验证：作为标准品用于手性 HPLC-UV 或 LC-MS/MS 检测方法的验证，确认方法的线性范围（通常为 0.1-20 μg/mL）、回收率（95%-105%）及手性分离度（Rs＞1.5）—— 针对滴眼液中防腐剂（如苯扎氯铵）的基质干扰，可选择 254 nm（噻吩并噻喃母核特征吸收峰）作为检测波长，或采用 LC-MS/MS 监测分子离子峰 m/z 325.1（游离碱 [M+H]+）及特征碎片峰 m/z 248.0（失去乙氨基片段），提升检测特异性。
多佐胺是首个局部外用的碳酸酐酶抑制剂，通过抑制眼部睫状体中的碳酸酐酶 Ⅱ，减少房水生成，降低眼压，临床用于治疗开角型青光眼和高眼压症，因局部用药副作用小（避免全身用药的电解质紊乱风险），广泛应用于眼科临床，需严格控制 EP 规定杂质以保障眼部用药安全性（眼部组织对杂质刺激敏感）。
(4R,6S)- 多佐胺 EP 杂质 B（盐酸盐）是多佐胺合成中 “氧化 - 手性” 双副反应生成的关键杂质：多佐胺的合成需经 “噻吩并噻喃环构建 - 环氧化 - 4 位氨基化 - 磺酰胺化 - 盐酸成盐” 多步反应，其中环氧化步骤若氧化程度失控，易生成 7,7 - 二氧化物副产物；4 位氨基乙基化步骤若手性控制偏差，会形成 (4R,6S) 非目标构型；最终该副产物以盐酸盐形式残留于终产品中，且因与多佐胺理化性质（如极性、色谱保留行为）相近，常规精制难以完全去除。
由于眼科药物直接作用于敏感的眼部组织，杂质的存在可能诱发眼部刺激、过敏等不良反应，甚至影响眼压控制效果。因此，对该 EP 规定杂质的研究与控制，是保障多佐胺用药合规性、符合 EP（欧洲药典）、FDA（美国食品药品监督管理局）对眼科局部用药杂质控制要求的关键环节。
检测技术成熟度：当前主流检测方法为手性 HPLC-UV，采用 Chiralpak AD-H 手性柱，以乙腈 - 0.1% 三氟乙酸水溶液（30:70，v/v）为流动相，检测波长 254 nm，可在 15 分钟内实现 (4R,6S) 构型杂质与多佐胺主峰的分离，定量限（LOQ）达 0.05 μg/mL，满足 EP 规定的 “杂质 B 限量＜0.5%” 要求；对于痕量分析，UPLC-MS/MS 技术可通过监测 m/z 325.1→248.0 的特征离子对，进一步提升灵敏度至 ng 级，有效规避滴眼液中辅料与防腐剂的干扰。
生成机制明确性：研究证实，该杂质的生成主要与 “环氧化反应的氧化程度” 及 “4 位氨基化的手性选择性” 相关 —— 氧化剂与底物摩尔比超过 1.5:1 时，7,7 - 二氧化物生成量显著增加；手性催化剂（如 chiral Ru 配合物）的配体位阻不足，会导致 (4R,6S) 构型生成比例升高；工艺优化方向已明确为 “氧化剂摩尔比控制在 1.0-1.2:1、选用大位阻手性 Ru 催化剂、成盐时盐酸浓度控制在 0.5-1.0 mol/L”。
安全性与标准进展：毒理学研究显示，该杂质无急性眼部刺激毒性，对碳酸酐酶 Ⅱ 的抑制活性仅为多佐胺的 1/20，长期高浓度（＞10 μg/mL）暴露无明显眼部组织损伤；目前，EP 已在多佐胺质量标准中明确杂质 B 的化学结构、检测方法及限量要求（＜0.5%），USP（美国药典）在多佐胺相关标准中也将其列为需监控的特定手性杂质，现有研究数据为标准制定与工艺优化提供了核心依据。