商品属性:
产品名称
梅毒螺旋体(TP)检测试剂盒(荧光PCR法)
检测方法
荧光PCR法
货号
XG-P1143
应用范围
核酸的定性检测
规格
50T
用途
仅供科研研究实验
一、产品核心信息
检测靶标:梅毒螺旋体(Treponema pallidum)特异性DNA序列
方法学:实时荧光定量PCR(TaqMan探针技术)
临床用途:
梅毒的早期实验室诊断
神经梅毒和先天性梅毒的辅助诊断
治疗效果的分子生物学评估
特殊样本(如脑脊液)的病原体检测
二、技术原理详解
靶基因选择:
针对TP的polA、tpp47或16S rRNA等高度保守的特异性基因区域设计引物和探针
检测机制:
特异性引物扩增目标DNA片段
荧光标记探针与扩增产物结合后释放荧光信号
实时监测荧光强度变化,通过Ct值定量分析病原体载量
防污染设计:
采用dUTP/UNG酶系统防止PCR产物污染
三、试剂盒组成
表:主要组分及功能
组分 规格 功能说明
PCR反应预混液 1mL×2管 含优化缓冲体系、dNTPs、Mg2?
HotStart Taq酶 100U/管 热启动DNA聚合酶
TP引物探针混合液 200μL×1管 特异性检测引物及FAM标记探针
内参对照 200μL×1管 HEX/VIC标记的内参系统
阳性对照 100μL×1管 含TP特异性DNA片段
阴性对照 100μL×1管 无核酸酶水
四、样本要求与处理
1. 适用样本类型
首选样本:
溃疡渗出液(硬下疳期)
脑脊液(神经梅毒疑似病例)
羊水(先天性梅毒筛查)
替代样本:
全血(EDTA抗凝)
组织活检标本
2. 样本采集与保存
溃疡样本:用无菌拭子采集基底部渗出物,置于病毒转运培养基
脑脊液:无菌采集2-3mL,避免血液污染
保存条件:
4℃保存≤72小时
-70℃长期保存(避免反复冻融>3次)
五、标准操作流程
1. 核酸提取
推荐使用配套核酸提取试剂盒,严格按以下步骤操作:
样本裂解:加入裂解液震荡混匀
核酸结合:转移至吸附柱离心
洗涤:用洗涤缓冲液清洗两次
洗脱:50μL洗脱缓冲液收集DNA
2. PCR反应体系
按以下比例配制(单反应体积25μL):
预混液 12.5μL
酶混合液 1.0μL
引物探针混合液 2.5μL
模板DNA 5.0μL
无核酸酶水 4.0μL
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