商品属性：
产品名称 | 马疱疹病毒4型（EHV-IV）检测试剂盒（荧光PCR法） | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1158 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
一、检测原理与核心特点
靶基因设计
特异性靶向EHV-4的糖蛋白B（gB）基因或DNA聚合酶（ORF30）基因保守区域，设计TaqMan探针（FAM标记），避免与EHV-1（马疱疹病毒1型）交叉反应。
灵敏度：可检测低至10拷贝/μL的病毒DNA，适用于早期感染或潜伏期样本。
技术优势
采用热启动Taq酶和UNG-dUTP防污染系统，减少非特异性扩增；
部分试剂盒含内参基因（如马β-actin），监控样本质量与提取效率。
二、试剂盒核心组分
组分 作用说明 储存条件
核酸提取试剂 裂解液、蛋白酶K、磁珠/离心柱 室温或4℃
qPCR预混液 含热启动酶、dNTPs、Mg2 -20℃避光
EHV-4引物探针混合液 特异性扩增gB/ORF30基因（FAM通道） -20℃避光
阳性对照 灭活EHV-4病毒核酸（Ct值20-25） -80℃长期保存
阴性对照 无核酸酶水 室温
三、样本采集与处理
推荐样本类型
鼻咽拭子：优先采集急性期呼吸道分泌物（需含上皮细胞）；
全血（EDTA抗凝）：适用于病毒血症检测；
流产胎儿组织（如肺、肝）：用于EHV-4相关流产诊断。
前处理要求
拭子样本需悬浮于病毒运输液（如Hank's平衡盐溶液），-80℃保存避免反复冻融；
组织样本需匀浆后离心取上清，DNA浓度建议≥20ng/μL。
四、检测流程与结果解读
qPCR程序
反应体系：25μL（含5μL模板DNA）；
扩增程序：50℃ 2min（UNG消化）→ 95℃ 10min →（95℃ 15s → 60℃ 1min）×45循环。
结果判读标准
阳性：FAM通道Ct值≤35，扩增曲线呈典型S型；
可疑：35<Ct值<40，需重复检测或测序确认；
阴性：无扩增曲线（内参基因正常）。
五、临床意义与注意事项
应用场景
诊断马呼吸道疾病（如鼻肺炎）、流产及神经症状；
监测马群中EHV-4携带状态，指导隔离与疫苗接种。
关键注意事项
防污染：严格分区操作，使用带滤芯吸头；
局限性：无法区分疫苗株与野毒株（需结合基因测序）；
生物安全：操作需在BSL-2实验室进行，废弃物需高压灭菌。
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关键字： 马疱疹病毒4型;检测试剂盒;荧光PCR法;
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