马疱疹病毒1型（EHV-1）检测试剂盒（荧光PCR法）
一、产品核心信息
检测靶标：马疱疹病毒1型(EHV-1)糖蛋白B(gB)基因保守区
方法学：双重荧光PCR(可区分神经毒株与非神经毒株)
临床意义：
马呼吸道疾病诊断
流产病因学分析
神经型EHV-1早期预警
产品名称
分类
荧光PCR
货号
XG-P1159
用途
仅供科研研究实验
二、技术原理
1. 分子检测基础
双靶标设计：
主靶标：gB基因(所有EHV-1毒株)
辅助靶标：ORF30基因(D752/N752多态性位点)
2. 探针系统
通道 靶标 荧光标记 鉴别功能
FAM gB基因 绿色 EHV-1通用检测
HEX ORF30基因 黄色 神经毒株标志(D752突变)
三、试剂盒组成
表：核心组分与规格
组分 规格 保存条件 功能说明
双重PCR预混液 1mL×2 -20℃ 含dUTP/UNG系统
逆转录酶混合液 200μL -20℃ 含RNase抑制剂
冻干引物探针组 20tests/瓶 -20℃避光 双靶标检测系统
阳性定量标准品 5×50μL -80℃ 102-10?拷贝/μL
内标RNA 100μL -80℃ 监测提取效率
四、样本采集与处理
1. 优选样本类型
呼吸道症状马匹：
鼻咽拭子(置于病毒转运培养基)
支气管肺泡灌洗液
神经症状马匹：
脑脊液(无菌采集1-2mL)
全血(EDTA抗凝，检测病毒血症)
流产病例：
胎儿组织(肝/肺/脾)
胎盘组织
2. 样本处理要点
液体样本：
4℃保存≤72小时
长期保存需-70℃以下
组织样本：
按1:5(w/v)加入PBS匀浆
3000rpm离心10min取上清
五、标准化操作流程
1. 核酸提取(推荐磁珠法)
裂解：加入560μL裂解液和20μL内标RNA
结合：磁珠室温孵育10min
洗涤：80%乙醇清洗两次
洗脱：60μL洗脱缓冲液收集核酸
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