商品属性：
产品名称 | 马链球菌兽疫亚种（ SEZ）检测试剂盒（荧光PCR法） | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1161 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
一、 核心概述：这是什么？用来做什么？
产品名称： 马链球菌兽疫亚种检测试剂盒（荧光PCR法）
检测目标： 马链球菌兽疫亚种 的特异性核酸（DNA）。SEZ是Lancefield群C群中的一种重要病原体。
方法原理： 实时荧光PCR法。该方法针对SEZ独有的基因序列进行特异性扩增和检测。
主要应用场景：
猪场疫病诊断： SEZ是猪链球菌病的主要病原之一，可引起猪的急性败血症、脑膜炎、关节炎和突然死亡，对养猪业危害巨大。
其他动物感染诊断： 也可用于诊断马、牛、羊等动物的感染。
公共卫生安全： SEZ是人畜共患病病原体，可通过接触病猪或猪肉产品感染人，引起脑膜炎、败血症等严重疾病。该检测用于病原的快速鉴定。
流行病学调查与监测： 在养殖场或地区范围内进行病原监测，了解流行情况。
食品安全监测： 对猪肉及相关产品进行病原检测。
二、 技术原理详解：荧光PCR法如何工作？
样本采集与DNA提取：
样本类型： 可采集发病动物的血液、脑脊液、关节液、淋巴结或病死猪的组织脏器（如脾、肝）等。
DNA提取： 从样本中提取总DNA。SEZ是细菌，DNA提取相对直接，但需保证能裂解细菌细胞壁。
PCR反应体系配制： 将提取的DNA模板与试剂盒内的以下成分混合：
PCR反应液： 含有针对SEZ特异性基因序列的引物和荧光探针（通常为TaqMan探针）。
热启动Taq DNA聚合酶： 用于催化DNA扩增。
内标： 高质量的试剂盒会包含一个内参基因。这通常是一个添加到样本中的已知序列，用于监控DNA提取效率和PCR过程是否存在抑制物，是判断“假阴性”的关键。
实时荧光PCR扩增与检测：
将反应管放入实时荧光PCR仪中运行程序。
在每一个循环的延伸阶段，Taq酶会水解与目标DNA结合的探针，释放出荧光信号。
仪器实时监测荧光信号的强度。当目标DNA片段被特异性扩增时，荧光信号会随之增强。
结果判读：
阳性结果： 在检测通道（如FAM通道） 出现典型的“S”型扩增曲线，且Ct值（荧光信号达到阈值时的循环数）小于设定的临界值（如Ct ≤ 35）。这表明样本中存在SEZ的DNA。
阴性结果： 在检测通道无扩增曲线或Ct值大于临界值。
内标验证： 内标通道（如VIC/HEX通道）必须出现正常扩增曲线。这证明DNA提取和PCR过程有效。如果内标无扩增，则本次检测无效，结果为“不确定”。
三、 试剂盒核心组分（示例）
SEZ-PCR反应液： 含有特异性引物、探针的预混液。
酶混合物： 热启动Taq酶。
阳性对照： 含有SEZ特异性DNA片段的质粒。
阴性对照： 无核酸酶水。
内标溶液。
四、 技术优势与特点
高特异性： 能准确鉴定SEZ，与其他链球菌（如猪链球菌Ⅱ型、停乳链球菌等）进行精确区分。
高灵敏度： 即使样本中只有极少量的细菌，也能检测出来，有利于早期诊断和防控。
快速： 整个检测过程可在2小时内完成，远快于传统的细菌分离培养和生化鉴定（通常需要24-48小时）。
早期诊断： 在动物发病初期，甚至还未出现典型症状时，即可检出病原，为及时治疗和防控赢得时间。
安全性高： 直接检测核酸，无需操作活细菌，生物安全风险低。
五、 重要注意事项与局限性
样本采集的挑战： 样本采集的部位和时间直接影响检测结果。例如，在败血症期采集血液样本阳性率最高。
操作要求高： 需要进行DNA提取和PCR操作，必须在标准的分子生物学实验室进行，并严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区）以防止污染。
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