HuCCT1人肝内胆管细胞癌细胞

                                                           HuCCT1人肝内胆管细胞癌细胞
产品信息：

HuCCT1 是一种人肝内胆管细胞癌细胞系，常用于肝内胆管癌（ICC）的研究。以下是其详细介绍、培养操作和特性：

细胞说明：

来源与背景：HuCCT1 细胞系来源于一位 56 岁日本男性肝内胆管癌患者的腹水恶性细胞。该细胞系具有低分化腺癌特征，表达胆管细胞标志物（如 CK7、CK19）。

分子特征：可能携带肝癌相关基因突变，如 KRAS、TP53 等。

应用领域：广泛用于肝内胆管癌的机制研究、药物开发（如化疗药物或靶向药物测试）以及基因工程研究。

培养操作：

培养基：推荐使用 RPMI-1640 或 DMEM 高糖培养基，添加 10% 胎牛血清（FBS）。

培养环境：37℃、5% CO₂ 培养箱，湿度饱和。

传代方法：细胞密度达 80%-90% 时进行传代。用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次，加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 溶液消化 1-2 分钟，显微镜下观察细胞变圆并脱落后，加入含血清的培养基终止消化。离心收集细胞，用新鲜培养基重悬细胞并按 1:2 至 1:5 比例接种到新培养瓶中。

冻存与复苏：冻存液为 90% FBS + 10% DMSO。复苏时将冻存管迅速放入 37℃ 水浴中解冻，离心后弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞并接种到培养瓶中培养过夜。

细胞特性：

生长特性：贴壁生长，形态为上皮细胞样，呈多角形或卵圆形。生长速度中等，倍增时间约为 48 小时。

注意事项：消化时需严格控制胰酶消化时间，避免过度消化导致细胞损伤。定期观察细胞形态和生长状态，确保无污染。

HuCCT1 细胞系作为一种典型的人肝内胆管癌模型，在研究肝内胆管癌的分子机制、药物筛选和治疗策略等方面具有重要的科学价值。

基本操作步骤：

原代培养：取材→分离→培养，需保持材料新鲜及严格无菌2。

传代培养：贴壁细胞需胰酶消化，悬浮细胞可直接传代，离心后重悬分瓶23。

冻存与复苏：使用含10%DMSO的冻存液，程序降温后液氮保存；复苏时快速37℃水浴解冻。

具体特点如下：

环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。

生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。

传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。

敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。

应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。

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注意事项与应用：

无菌操作：必须严格无菌无毒，避免微生物污染和不同细胞间交叉污染。

营养需求：需提供氨基酸、维生素、无机盐、促生长因子等，动物细胞还需血清。

抗生素使用：可添加双抗或三抗预防污染，但长期培养不建议持续使用，以防产生耐药性。

细胞培养技术是生物医学研究的基础工具，可用于细胞生理代谢、药物筛选、疫苗生产等研究。不同细胞系的具体培养条件需参考相关文献或实验经验调整。