商品属性:

副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种常见的食源性病原菌,尤其在海产品中携带率较高,可引起食物中毒和急性肠胃炎。
产品名称 | 副溶血性弧菌 /GS-VP 流行株检测试剂盒( 双重荧光 PCR 法 ) | 检测方法 | 荧光PCR法 |
货号 | XG-P1388 | 应用范围 | 核酸的定性检测 |
规格 | 50T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
GS-VP流行株是指具有特定毒力基因型的副溶血性弧菌菌株,通常与大规模食物中毒事件相关
双重荧光PCR法通过同时检测多个靶基因,能够快速、灵敏、特异地鉴定副溶血性弧菌及其流行株。
以下为副溶血性弧菌/GS-VP流行株检测试剂盒(双重荧光PCR法)特点:
检测原理:

基于实时荧光定量PCR技术,通过特异性引物和荧光探针,同时针对副溶血性弧菌的两个保守基因进行检测,
通常包括不耐热溶血素基因(tlh)和耐热直接溶血素基因(tdh)或毒素调控基因(toxR)
在PCR扩增过程中,两种不同荧光信号分别随目标基因扩增产物的增加而增强,通过实时监测荧光信号变化,实现对副溶血性弧菌及其流行株的定性和/或定量检测。
检测样本:
主要采集疑似污染的海产品(如鱼类、贝类、甲壳类)、食物、水样等样本。
操作步骤(以典型试剂盒为例):

样本采集与核酸提取:
采集可疑食物或海产品样本,进行适当处理(如匀浆、研磨)后,提取样本中的总DNA,确保核酸质量和纯度。
PCR反应体系配置:
根据试剂盒说明书,配制PCR反应体系,包括模板DNA、特异性引物(针对tlh和tdh/toxR)、两种荧光探针(分别标记不同荧光基团)、PCR缓冲液、dNTPs、Taq酶等。
每个样本设置技术重复,同时设立阳性对照、阴性对照和空白对照。
PCR扩增与检测:
将反应管放入实时荧光定量PCR仪中,设置扩增程序(通常包括预变性、变性、退火延伸等步骤)。
实时监测两种荧光信号,记录各自对应的Ct值(循环阈值)。
结果分析:
通过PCR仪配套软件分析荧光信号,判断样本中是否存在副溶血性弧菌及其流行株。
根据Ct值判断阳性或阴性,通常Ct值越小,表示细菌载量越高。若tlh和tdh基因均呈阳性,则提示可能为GS-VP流行株。
操作特点:

高灵敏度与特异性:双重荧光PCR法能够同时检测多个靶基因,提高检测的灵敏度和特异性,减少假阳性结果。
快速检测:整个检测过程通常在数小时内完成,适合快速诊断和食品安全监控。
多重检测:可同时检测副溶血性弧菌的存在及其是否携带特定毒力基因,有助于区分普通株和流行株。
自动化兼容:适用于自动化核酸提取和PCR检测平台,适合大规模样本筛查。
注意事项:

严格分区操作:为避免交叉污染,实验应分为试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区,各区物品专用。
对照设置:每次实验应设置阳性对照、阴性对照和空白对照,确保实验结果的准确性。
试剂保存:试剂盒中的试剂应按照说明书要求保存,通常需避光、低温保存,避免反复冻融。
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关键字: 副溶血性弧菌;检测试剂盒;双重荧光 PCR 法;
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