人神经胶质细胞瘤细胞带绿色荧光 ;U251/GFP
产品信息:

U251/GFP细胞是U251人神经胶质细胞瘤细胞经基因修饰表达绿色荧光蛋白(GFP)的衍生物,用于荧光示踪;其培养操作与U251细胞基本一致,具有贴壁生长、成纤维细胞样形态等特性。
产品名称 | 人神经胶质细胞瘤细胞带绿色荧光 ;U251/GFP | 英文名称 | U251/GFP:U251GFP |
货号 | AXB9888 | 生长特性 | 贴壁生长 |
详细说明
来源与特性:U251/GFP细胞由U251细胞(源自75岁人脑胶质母细胞瘤组织)转染GFP基因构建,便于通过荧光显微镜实时观察细胞定位、增殖或迁移等行为;形态为成纤维细胞样,贴壁生长。
用途:广泛应用于肿瘤生物学、药物筛选、基因功能及治疗示踪等领域,如研究细胞自噬机制或化疗药物效果评估。
培养操作
复苏细胞:将冻存管于37°C水浴快速解冻,加入含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基(90% DMEM+10% FBS)混合后,1000 rpm离心5 min,弃上清,重悬后接种至T25培养瓶,置于37°C、5% CO₂培养箱静置2–4 h。
传代:当细胞密度达80%–90%时进行:
贴壁细胞:弃培养基,PBS润洗1–2次,加1–2 ml 0.25%胰酶-EDTA溶液消化1–2 min,显微镜下观察细胞变圆脱落,加完全培养基终止消化,吹打混匀后离心(1000 rpm, 5 min),弃上清,重悬后按1:2–1:5比例分瓶。
悬浮细胞:直接收集细胞悬液离心,重悬后分瓶。
冻存:用无血清冻存液或90% FBS+10% DMSO,程序降温至-80°C后转入液氮长期保存。
培养条件:37°C、5% CO₂、饱和湿度,使用含10% FBS的DMEM高糖培养基。
注意事项
收到细胞后需用75%酒精消毒瓶身,在超净台观察细胞状态,前3天建议拍照记录以便沟通。
严格无菌操作,定期检测支原体,避免过度消化影响细胞活性。
运输培养基不可再用,需更换新鲜配制完全培养基。

基本操作步骤:

原代培养:取材→分离→培养,需保持材料新鲜及严格无菌2。
传代培养:贴壁细胞需胰酶消化,悬浮细胞可直接传代,离心后重悬分瓶23。
冻存与复苏:使用含10%DMSO的冻存液,程序降温后液氮保存;复苏时快速37℃水浴解冻。
培养操作要点:

基础培养基选择:分为天然培养基、合成培养基(如DMEM、RPMI 1640)和无血清培养基45。目前以合成培养基和无血清培养基使用居多。
培养条件设置:
温度:多数人和哺乳动物细胞为36-37℃,昆虫细胞为27℃。
pH值:多数哺乳动物细胞为7.4,昆虫细胞为6.2。
CO₂浓度:通常维持5-7% CO₂,多数细胞适合5% CO₂气氛。
渗透压:控制在260-320mOsm/kg为宜。
公司正在出售的产品:
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具体特点如下:

环境与营养:需无菌环境、精确的温度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),动物细胞常需血清,植物细胞需激素。
生长方式:贴壁细胞需表面附着,悬浮细胞自由漂浮,半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度:贴壁细胞需胰酶消化传代,悬浮细胞直接分瓶;密度达80%-90%时需传代,避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性:对剪切应力、污染、温度变化敏感,需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限:便于活细胞观察与实验控制,但体外环境与体内存在差异,长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
关键字: U251/GFP;人神经胶质细胞瘤细胞带绿色荧光;贴壁细胞;
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