超微量ATP酶测定试剂盒(Na+K+、Ca2+Mg2+、T-ATP酶)100管/25样
测试原理:
ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及无机磷,测定无机磷的量可判断 ATP 酶活力的高低。0.1μmol/ml 标准磷应用液的配制:
用时将 10mmol/L 磷贮备液 100 倍稀释,即取 0.1ml 加双蒸水至 10ml。
0.02μmol/ml 磷标准液的配制:
用时将 0.1 μmol/ml 磷标准液用双蒸水 5 倍稀释,即取 0.1 μmol/ml 磷标准液 1ml 加双蒸水 4ml。
基质液的配制:
按试剂一 ︰试剂二︰试剂三=260 ︰ 80 ︰ 80 比例混合。需多少配多少,现用现配。
显色剂的配制:
用时取一瓶试剂五甲液加入一瓶已预温好试剂五乙液中,充分混匀,需提前 0.5 小时配制,2~8℃条件下至少可保存 5 天,配好的显色剂的量够做 13 个管子(如果你的样本量很少,所需的显色剂的量较少,那么你可以按试剂五中的甲液︰乙液=7 ︰ 6 的比例自行配制显色剂,需多少配多少(按比例配制显色剂时要防止磷污染,最好用专用吸嘴)。
样本前处理:样本处理详见说明书或本公司官网-技术文章部分关于样本处理的说明。测定组织和细胞同时需要测定蛋白浓度。可用总蛋白定量测试盒(考马斯亮蓝法)或者总蛋白定量测试盒(BCA 法)进行蛋白浓度的测定。
操作表:
空白管
标准管
对照管
Na+k+-ATPase
测定管
Ca2+Mg2-ATP
ase
T-ATPase
双蒸水(ml)
0.3
0.02μmol/磷标准液(ml)
上清液(ml)
试剂五显色剂
(ml)
1.0
混匀,室温静止 2分钟
试剂六(ml)
混匀,室温静置 5 分钟,在 636nm 处,1cm 光径,双蒸水调零,测各管
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