总抗坏血酸(TAA)含量测定(红菲咯啉法)分光法/48样
产品简介：
总抗坏血酸 (TAA) 包括还原型和脱氢型抗坏血酸，其中脱氢抗坏血酸被还原为还原型抗坏血酸，接着还原型抗坏血酸把三价铁离子还原成二价铁离子，二价铁离子与红菲咯啉反应生成红色络和物，在534nm 处有特征吸收峰，颜色深浅与还原型抗坏血酸含量成正比，继而计算得出总抗坏血酸的含量。
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径1cm)、 研钵、冰、低温离心机、无水乙醇、可调式移液器和蒸馏水。
总抗坏血酸( TAA)含量测定：
建议正式实验前选取2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费!
样本制备：
①组织样本：
称取约0 . 1g 组织(水分充足的果实样本取约0.5g 组织或更多),加入1mL 预先预冷的提取液，进行冰浴匀浆，室温静提10min 后，12000rpm,4℃离心1 0min, 取上清，置冰上待测。
[注]: 若增加样本，可按照组织质量 (g): 提取液体积(mL) 为1:5~10的比例进行提取。
上机检测：
①可见分光光度计预热30 min, 调节波长到534nm, 蒸馏水调零。
② 取 0 . 1mL上清液至新EP管中，加入0.05m试剂a混匀，接着加入0.4mL试剂b
混匀，(此时整体液体为中性：PH 为7-8),室温(25℃)下反应10min, 之后再加0. 1mL
试剂c 混匀(此时整体液体为酸性：PH 为1-2),此混合液为 TAA 待检液。
③依次在 EP 管中依次加入：
试剂名称(μL) | 测定管 | 标准管 (仅做一次) | 空白管 (仅做一次) |
AA待检液 | 300 |
|
|
标准液 |
| 300 |
|
提取液 |
|
| 300 |
试剂一 | 150 | 150 | 150 |
无水乙醇 | 150 | 150 | 150 |
试剂二B液 | 75 | 75 | 75 |
试剂三 | 150 | 150 | 150 |
试剂四 | 75 | 75 | 75 |
混匀，于30℃反应60min后，立即取全部澄清液体(若有沉淀需8000rpm,室温离心5min,取上清液)至1mL玻璃比色皿中，立即534nm处读取各管吸光值A。 |
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