吡咯啉-5-羧酸还原酶(P5CR)测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
吡咯啉-5-羧酸还原酶( P5CRs) 是普遍存在于原核和真核生物中的一类重要的管家蛋白。其主要功能是催化脯氨酸生物合成的最后一步反应,将吡咯啉-5-羧酸( P5C) 转化为脯氨酸,在调节细胞凋亡等一系列病理和生理过程中起着重要作用。
测定原理:
P5CR 具有噻唑烷-4-羧酸脱氢酶活性,催化噻唑烷-4-羧酸的脱氢反应,同时将 NAD 转化为 NADH,测定340nm 下吸光值增加速率来反映酶的活性。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水测定步骤:
在 EP 管中加入如下试剂
1 、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
2 、样本测定
(1)在试剂二中加入 25mL 试剂一充分溶解混匀,现配现用;
(2)在 96 孔板中加入 50 μ L 样本和 950 μ L 试剂二,混匀,立即记录 340nm 处 10s 时的吸光值 A1和 2min10s 时的吸光值 A2,计算 ΔA=A2-A1。
注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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