β-1,3-1,4-葡聚糖酶活测定试剂盒分光法/48样
产品简介:
β-1,3-1,4-葡聚糖酶(又称地衣多糖酶;EC 3.2.1.73)是一类重要的水解酶,可以水解谷物中的β-1,3-1,4-葡聚糖,其在食品、饲料和纺织等领域的具有重要应用价值。
β-1,3-1,4-葡聚糖酶水解底物葡聚糖产生还原性糖。利用 3,5-二硝基水杨酸测定还原糖的量,在 540nm 读取吸光值,进而得出β-1,3-1,4-葡聚糖酶的活性大小。
试剂盒组成和配制:
试剂名称 | 规格 | 保存要求 | 备注 |
提取液 | 液体60mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂一 | 液体30mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂二 | 粉剂mg×1瓶 | 4℃保存 | 临用前甩几下使粉剂落入底部,再加1.1mL10min充分溶解,冷却至室温待用。 |
试剂三 | 液体30mL×1瓶 | 4℃保存 |
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标准品 | 粉剂mg×1瓶 | 4℃保存 | 若重新做标曲,则用到该试剂。 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、 1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、恒温培养箱、研钵、蒸馏水。
β-1 , 3-1 ,4-葡聚糖酶(β-1 , 3-1 ,4-GA)活性检测:
建议正式实验前选取2个样本做预测定,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!
样本制备:
① 组织样本:
取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆,4℃×12000rpm 离心 15min,取上清液待测。
[注]:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1 :5~10 的比例提取。
② 细菌/真菌样本:
先收集细菌/真菌到离心管内,离心后弃上清;取 500 万细菌/真菌加入 1mL 提取液;
冰浴超声波破碎细菌/真菌(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s, 间隔 10s,重复 30次);12000rpm, 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
[注]:也可按照细菌或细胞数量(10⁴个):提取液体积(mL)为 500~1000 :1 的比例进行提取。
③ 若是澄清液体,直接检测,若液体样本浑浊,需 4℃×12000rpm,离心 10min,取上清液检测
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