α-甘露糖苷酶(α-Mannosidase,α-Man)活性测定试剂盒分光法/24样
产品简介:
α-甘露糖苷酶 (EC 3.2.1.24,α-Man)是参与植物体内 N-聚糖加工的关键酶之一。是植物 细胞壁糖蛋白代谢过程中的关键性糖苷酶,在分生组织的生长、果实的成熟软化、种子的 萌发等生理进程中起重要作用。α-甘露糖苷酶(α-Man) 催化对硝基苯酚-α-D-毗喃甘露 糖苷产生对硝基苯酚 (PNP), 该产物在405nm 处有特征吸收峰,通过测定405nm 光 吸收增加速率,即可计算α-甘露糖苷酶活性。
试剂盒组成和配制:
试剂名称 | 规格 | 保存要求 | 备注 |
提取液 | 液体30mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂一 | 粉剂mg×1支 | 4℃保存 | 用前甩几下或离心使试剂落入底部,再加1.1mL蒸馏水超声溶解备用。 |
试剂二 | 液体20mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂三 | 液体20mL×1瓶 | 4℃保存 |
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标准品 | 粉剂×1支 | 4℃保存 | 若重新做标曲,则用到该试剂。 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径1cm)、可调式移液器、低温离心机、天平、 研钵、冰和蒸馏水。
α -甘露糖苷酶(a-Man)活性检测:
建议正式实验前选取2个样本做预测定,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!
样本制备:
①组织样本:取约0.1g 组织(水分充足的样本可取0.5g), 加 入 1mL 提取液,进行冰 浴匀浆。12000rpm,4℃ 离 心 1 0min, 取上清,置冰上待测。
[注]: 若增加样本量,可按照组织质量(g): 提取液体积(mL) 为1:5~10比例提取。
②细菌或细胞:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约500万细菌或细胞,加入1mL 提取
液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W, 超 声 3s, 间 隔 1 0s, 重 复 3 0 次);12000rpm,4℃ 离 心 1 0min, 取上清,置冰上待测。
[注]: 若增加样本量,可按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1
的比例提取。
③液体样本:直接检测。若浑浊,离心后取上清检测。
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