土壤植酸酶测定试剂盒/分光光度法/24S
测定意义:
植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应用价值。
测定原理:
植酸酶在一定温度和 pH 值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在 700nm 处有特征吸收峰,根据 700nm 处吸光值变化可计算得植酸酶活性。
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅,甲苯。测定操作表
对照管
测定管
样本(g)
0.06
甲苯
40
振荡混匀,室温放置 15min
缓冲液(µL)
1000
试剂一 (µL)
混匀,37℃孵育 24h ,10000g ,4℃离心 5min,取上清
上清
500
显色剂(µL)
混匀,静置 15min ,测定 700nm 处吸光值,△A=A 测定管-A 对照管。每个测定管
设一个对照管
注 意:
1、显色剂需要临用前根据用量配制,每一瓶是 5 个样本的用量,新配制的显色剂若有颜色则已经污染或者试剂过期,应放弃使用。
2、ΔA 线性范围为 0.01-1。
上海酶联生物科技有限公司
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