γ-谷氨酸激酶(γ-GK)试剂盒分光法/24样
产品简介:
γ-谷氨酸激酶(y-GK,EC 2.7.2.11)是脯氨酸生物合成途径中的关键酶之一。催化由谷氨酸 生成脯氨酸途径的第一步反应。本试剂盒利用γ-GK 催化谷氨酸磷酸化,进一步转化为γ- 谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与 Fe3+形成 Hydroxamate-Fe3+ 复合物,通过检测该 复合物在535 nm 波长处的 OD 值,进而得出γ-GK 酶活力大小。该酶催化的反应方程 式:ATP+L-glutamate=ADP+L-glutamate 5-phosphate。
试剂盒组成和配制:
试剂名称 | 规格 | 保存要求 | 备注 |
提取液 | 液体30mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂一 | 液体8mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂二 | 粉体mg×1瓶 | 4℃保存 | 临用前甩几下,使粉体落到底部,再加入10mL蒸馏水溶解备用 |
试剂三 | 液体8mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂四 | 粉体mg×1支 | 4℃保存 | 临用前甩几下,使粉体落到底部,再加入1.8mL蒸馏水溶解备用。 |
试剂五 | 液体15mL×1瓶 | 4℃保存 |
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所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径1cm)、 水浴锅、离心机、可调式移液器、 研钵、冰和蒸馏水。
y -谷氨酸激酶(y- G K)酶活性检测:
建议正式实验前选取2个样本做预测定,了解本批样本情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!
样本制备:
取约0 . 1g 组织,加入1mL 提取液,冰浴匀浆,12000rpm,4℃ 离 心 1 0min, 取上清液待用。
[注]: 若增加样本量,可按照组织质量 (g): 提取液体积(mL)为1:5~10的比例进行提取。
细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约500万细菌或细胞加入1mL 提取液,
超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率200W, 超 声 3s,间 隔 1 0s,重复30次);12000rpm 4℃离心10min, 取上清,置冰上待测。
[注]: 若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10⁴):提取液 (mL) 为500~1000:1 的比例进行提取。
液体样本:
澄清的液体样本直接检测,若浑浊则离心后取上清检测。
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上海酶联生物科技有限公司,成立之初,获得国内外酶联免疫同行的大力支持,公司为了感恩于同行无私的帮助,特取意酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA试剂盒)的“酶联”两字,时刻铭记回报社会,公司已制定十年内,将公司打造成国内酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)行业超级航母,并且,这么多年,我们一直是为了这个愿景,坚定不移的努力奋斗着。