非洲猪瘟病毒(ASFV)检测试剂盒(恒温荧光法)
试剂简介:
非洲猪瘟病毒(ASFV)检测试剂盒(恒温荧光法)是一种基于恒温荧光检测技术的核酸检测试剂盒,用于非洲猪瘟病毒的快速检测。
产品名称 | 非洲猪瘟病毒(ASFV)检测试剂盒(恒温荧光法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1414 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
产品原理与组成
该试剂盒基于恒温荧光检测技术(如ERA等温扩增法),通过特异性引物和探针识别ASFV核酸片段,在恒温(如37℃)条件下进行指数级扩增,荧光信号由仪器实时捕获并自动判读结果。试剂盒主要组成包括:
反应液(A-ASFV-I)、酶混合物(B-I)、核酸释放剂(C-I)
阳性对照(PG-ASFV-I)和阴性对照(NG)
规格通常为50T或48T,-20℃保存,有效期12个月
操作流程
样本处理:采集抗凝血、脾脏、扁桃体、淋巴结等组织样本,按说明书研磨或裂解处理。
DNA提取:使用病毒基因组DNA提取试剂盒(如吸附柱法或磁珠法),操作需在冰上进行。
试剂配制与加样:
计算反应体系(如N+2个样本),分装反应液至PCR管
加入模板DNA(2μl),顺序为阴性对照、待测样本、阳性对照。
扩增反应:
恒温仪器设置63℃反应30分钟,实时监测荧光信号
或使用荧光定量PCR仪,设置FAM荧光基团,63℃ 45秒收集信号。
结果判定
仪器自动判读:显示“阳性”则样本含ASFV,显示“阴性”则无或低于检测限(102 copies/μl)。
扩增曲线判定:出现“S”型曲线为阳性,无曲线为阴性;阴性对照无扩增、阳性对照有扩增时结果有效。
产品特点
操作简便快速:反应温度温和(37℃或63℃),无需热循环,10-15分钟完成扩增,适合现场即时检验。
高灵敏度与特异性:检出限102 copies/μl,特异性识别ASFV核酸,假阴性率低。
污染控制:闭管检测减少气溶胶污染,分区操作(试剂准备、样本制备、模板添加、扩增分析)避免交叉污染。
适用样本广:可检测抗凝血、脾脏、扁桃体、淋巴结、肾脏、骨髓及钝缘软蜱等样本。
注意事项
分区操作:试剂准备、样本制备、模板添加、扩增分析需物理隔离,避免污染。
避光保存:反应液对光敏感,避免反复冻融;使用后扩增管需密封丢弃,禁止开盖。
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