非洲猪瘟病毒(ASFV)检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
试剂简介:
非洲猪瘟病毒(ASFV)检测试剂盒(PCR-荧光探针法)是一种用于快速、灵敏检测非洲猪瘟病毒核酸的分子诊断工具,广泛应用于兽医诊断和疫病防控。以下是其详细说明及操作特点:
产品名称 | 非洲猪瘟病毒(ASFV)检测试剂盒(PCR-荧光探针法) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1416 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
产品原理
基于实时荧光PCR技术,利用特异性引物和TaqMan探针,针对ASFV基因组中的保守区域(如p72基因或pp24基因)进行扩增和检测。
在PCR扩增过程中,Taq DNA聚合酶的5'→3'外切核酸酶活性将探针上的荧光基团释放,产生可检测的荧光信号,荧光强度与目标核酸量呈正相关,实现定量或定性分析。
产品特点
高灵敏度与特异性:能够检测低浓度的ASFV核酸,且通过特异性引物和探针设计,有效避免与其他病毒的交叉反应。
快速检测:整个PCR过程通常在1-2小时内完成,适用于快速诊断和疫情响应。
自动化与封闭式反应:全程自动化检测,减少人为误差和污染风险。
定量或定性分析:可根据Ct值(循环阈值)进行定量分析,辅助判断病毒载量或感染程度。
操作步骤
样本采集:采集猪全血、组织(如脾脏、淋巴结)或环境样本(如粪便、污水)。
核酸提取:从样本中提取ASFV DNA。
试剂准备:配制PCR反应液,加入模板核酸、引物、探针及酶混合液。
PCR扩增与检测:将反应管置于荧光定量PCR仪中,设置扩增程序(包括预变性、变性、退火/延伸等步骤),实时监测荧光信号。
结果分析:根据Ct值和扩增曲线判断样本中是否存在ASFV核酸。
注意事项
实验室分区:严格区分试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区,避免交叉污染。
对照设置:每次实验应设置阴性对照和阳性对照,确保结果可靠性。
仪器参数:根据试剂盒说明书设置PCR仪参数,如退火温度、荧光通道等。
废弃物处理:实验废弃物应进行无害化处理,防止生物污染。
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关键字: 非洲猪瘟病毒;检测试剂盒;PCR-荧光探针法;
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