游离脂肪酸含量(FFA)(酶法)试剂盒分光法/24样
产品简介:
游离脂肪酸又称非酯化脂肪酸(Nonestesterified fatty acid NEFA)。其是由油酸,软脂酸,亚油酸等组成。血清中游离脂肪酸的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关。也可反映食物贮藏中的品质变化。
游离脂肪酸和辅酶 A 在乙酰辅酶 A 合成酶(ACS)的作用下反应生成乙酰辅酶 A,乙酰辅酶 A 在乙酰辅酶 A 氧化酶的作用下成生 H2O2,随后通过 Trinder 底物在过氧化物酶(POD)的作用下生成有色产物。通过测定该有色产物在 546nm 处的值即可得出样本中游离脂肪酸的含量。
试剂盒组成和配制:
试剂名称 | 规格 | 保存要求 | 备注 |
试剂一 | 液体 10mL×1 瓶 | 4℃保存 |
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试剂二 | 液体 2.5mL×1 瓶 | 4℃保存 |
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标准品 | 液体 0.2mL×1 支 | 4℃保存 | 浓度为 1mmol/L。 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、可调式移液器、离心机、蒸馏水。
游离脂肪酸(NEFA)含量检测:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定 ,了解本批样品情况 ,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!
样本制备:
① 组织样本:
取约 0.1g 组织样本,加 1mL 生理盐水研磨,粗提液全部转移到 EP管中, 8000rpm,常温离心10min,上清液待测。
② 液体样品:澄清的液体可直接检测;若浑浊则离心后取上清液检测。
③ 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约500 万细菌或细胞加入1mL生理盐水研磨,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000rpm 常温离心10min,取上清待测。
[注] :若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10⁴): 提取液(mL)为 500~1000: 1 的比例进行提取。
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