几丁质酶测定试剂盒/微量法/48S
测定意义:
几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨) ,以及真菌类的细胞壁中。而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解,具有抵御真菌侵染的作用,成为抗真菌病害的研究热点。
测定原理:
几丁质酶水解几丁质产生 N-乙酰氨基葡萄糖,进一步与对二甲氨基苯甲醛产生红色化合物,在 585nm 处有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。
自备仪器和用品:
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯(土壤样品专用)和蒸馏水。试剂清单:
对照管
测定管
粗酶液(µL)
80
提取液(µL)
120
40
试剂一 (µL)
混匀,37℃水浴 1h
试剂二(µL)
混匀,沸水浴 7min ,5000rpm ,4℃ , 离心 10min ,取上清 200µL。
试剂三(µL)
试剂四(µL)
混匀,37℃ , 15min,于微量石英比色皿/96 孔板,测定 A585,ΔA=A 测定-A 对照。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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