Ca++Mg++ ——ATP酶测定试剂盒/微量法/48样
测定意义：
Ca++ Mg++-ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化 ATP 水解生成 ADP 和无机磷。
测定原理：
根据 Ca++ Mg++-ATP 酶分解 ATP 生成 ADP 及无机磷，通过测定无机磷的量来确定 ATP 酶活性高低。
自备仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 660nm，蒸馏水调零。
2、酶促反应（在 EP 管中加入下列试剂）。
| 对照管 | 测定管 |
试剂一 (μL） | 65 | 45 |
试剂二(μL） | 60 | 60 |
试剂三(μL） |
| 20 |
样本 (μL） |
| 100 |
混匀，37℃（哺乳动物）或 25℃（其他物种）准确水浴 10min
混匀，8000g ，25℃离心 10min，取上清液
3、定磷（在 EP 管或 96 孔板中加入下列试剂）
| 空白管 | 标准管 | 对照管 | 测定管 |
0.5μmol/ml 标准磷应用液(μL） |
| 20 |
|
|
上清液(μL） |
|
| 20 | 20 |
蒸馏水(μL） | 20 |
|
|
|
定磷试剂(μL） | 200 | 200 | 200 | 200 |
混匀，室温放置 30min，在 660nm 处，记录各管吸光值。
注 意：
1、由于每一个样都必须做对照，本试剂盒 100 管只能测 48 份 Ca++ Mg++-ATP 酶。
2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。避免磷污染是检测成败的关键。
3、空白管和标准管只要做一管。
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