腺苷脱氨酶(ADA)活性测定试剂盒微板法/96样
产品简介:
腺苷脱氨酶(ADA ,EC 3.5.4.4)是一种琉基酶,是嘌呤核苷酸代谢的关键酶,与机体细胞的免疫活性有重要关系。
腺苷脱氨酶(ADA)催化腺嘌呤核苷水解,产生次黄嘌呤核苷和氨,利用氨在强碱的环境下与次氯酸盐和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚蓝,溶液颜色稳定。其在 630nm 处有特征吸收峰,通过检测氨增加的速率,即可计算该酶活性大小。试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体100mL×1瓶
4°℃保存
试剂一
液体 20mL×1 瓶
试剂二
粉剂mg×2瓶
临用前甩几下使粉体落入底部,每瓶再加 11mL 蒸馏水溶解备用。
试剂三
液体20mL×1瓶
试剂四
液体12mL×1瓶
试剂五
液体 6mL×1 瓶
试剂六
A:液体 3.5mL×2 瓶
B:液体μL×1 支
4℃保存
临用前取30μL的B液进一瓶A 液中,混匀后作为试剂六使用。混匀后的试剂六一周内用完。
标准管
液体 mL×1 支
若重新做标曲,则用到该试剂
所需的仪器和用品:
酶标仪、96 孔板、水浴锅或恒温培养箱、离心机、可调式移液器、蒸馏水。
腺苷脱氨酶(ADA)活性测定:建议正式实验前选取 2 个样本做预测定 ,了解本批样品情况 ,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!样本制备:① 组织样本:称取约 0.1g 组织(水分足的样本可取 0.2-0.5g),加入1mL 提取液;进
行冰浴匀浆。12000rpm ,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
② 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。[注]:也可以按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1 :5~10 的比例提取。
上海酶联生物科技有限公司
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