天冬酰胺酶(ASNase/asparaginase)活性测定试剂盒微板法/96样
产品简介:
天冬酰胺酶( EC 3.5.1.1,ASNase)是一种酰胺水解酶,能够将 L-天冬酰胺脱去氨基生成L-天冬氨酸和氨。该酶具有抗肿瘤活性,在食品和医药等领域应用十分广泛。
天冬酰胺酶(ASNase)催化天冬酰胺水解成天冬氨酸和氨,利用氨在强碱的环境下与次氯酸盐和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚蓝,溶液颜色稳定。其在 630nm 处有特征吸收峰,通过检测氨增加的速率,即可计算该酶活性大小。试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体100mL×1瓶
4°℃保存
试剂一
液体 20mL×1 瓶
试剂二
粉剂mg×2瓶
临用前甩几下使粉体落入底部,每瓶再加 11mL 蒸馏水溶解备用。
试剂三
液体20mL×1瓶
试剂四
液体12mL×1瓶
试剂五
液体 6mL×1 瓶
试剂六
A:液体 3.5mL×2 瓶
B:液体μL×1 支
4℃保存
临用前取30μL的B液进一瓶A 液中,混匀后作为试剂六使用。混匀后的试剂六一周内用完。
标准管
液体 mL×1 支
若重新做标曲,则用到该试剂
所需的仪器和用品:酶标仪、96 孔板、台式离心机、可调式移液枪、研钵、冰和蒸馏水。
天冬酰胺酶(ASNase)活性测定:样本制备:① 组织样本:称取约 0.1g 组织(水分足的样本可取 0.2-0.5g),加入1mL提取液;进行冰浴匀浆。12000rpm,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 [注]:也可以按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例提取。
② 细菌/细胞样本:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
[注]:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(104):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测
上海酶联生物科技有限公司
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