α-L-鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase)测定试剂盒微板法/48样
产品简介:
α-L- 鼠李糖苷酶(α-L-rnhamnosidase,EC 3.2.1.40) 是一种水解酶,可以水解人们日常 饮食中常见的黄酮苷类化合物。该酶广泛分布于自然界的细菌和真菌等生物中。它在工业上具有许多潜在的应用价值。
本试剂盒采用对硝基酚-α-鼠李糖苷(PNPR) 作为底物,生成黄色的对硝基苯酚(PNP), 该 产物在405nm 处有大吸收峰。通过检测 PNP 在 4 0 5nm 下的增加速率,即可得到α-L-鼠李糖苷酶活性的大小。
试剂盒组成和配制:
试剂名称 | 规格 | 保存要求 | 备注 |
提取液 | 液体50mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂一 | 粉剂mg×1支 | -20℃保存 | 临用前甩几下或离心使试剂落入底部,再加1.1mL蒸馏水溶解混匀,若难溶解可超声溶解。 |
试剂二 | 液体10mL×1瓶 | 4℃保存 |
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试剂三 | 液体10mL×1瓶 | 4°℃保存 |
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标准品 | 粉剂mg×1支 | 4℃保存 | 若重新做标曲,则用到该试剂。 |
所需的仪器和用品:
酶标仪、96 孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、恒温培养箱、研钵、蒸馏水。
α-L-鼠李糖苷酶活性测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!
样本制备:
①组织样本:
取约0 . 1g 组织,加入1mL 提取液,进行冰浴匀浆,4℃×12000rpm 离心15min, 取上 清液待测。
[注]: 若增加样本量,可按照组织质量(g): 提取液体积(mL) 为1:5~10的比例提取。
②细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约500万细菌或细胞加入1mL 提取液, 超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率200W, 超 声 3s, 间隔10s, 重复30次);12000rpm 4℃离心10min, 取上清,置冰上待测。
[注]: 若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(104):提取液(mL) 为500~1000:1 的比例进行提取。
③液体样本:可直接测定,或者适当稀释后测定。若浑浊,离心后取上清检测。
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