羟自由基清除能力测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。
测定原理:
H2O2/ Fe²+ 通过 Fenton 反应产生羟自由基,将邻二氮菲- Fe²+水溶液中 Fe²+氧化为 Fe³+ ,导致 536nm 吸光度下降,样品对 536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了样品清除羟自由基的能力。
自备仪器和用品:
恒温水浴锅、酶标仪、96 孔板和蒸馏水。操作步骤:1、酶标仪预热 30min ,调节波长至 536nm。
2、工作液配制:使用之前按照每管试剂一:试剂二:试剂三=100:50:100 (µL)的比例配制,用多少配多少,混匀。
3、在 EP 管中加入如下试剂。
空白管
对照管
测定管
工作液(µL)
250
混匀,防止局部颜色过浓
样品(µL)
50
试剂四(µL)
H2O (µL)
100
混匀,37℃保温 60min ,8000g 25℃离心 5min ,吸取 200μL 于 96 孔板中测定 536nm 处吸光值,空白管、对照管和测定管的吸光值分别记为 A 空、A 对和 A 测。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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