谷胱甘肽S-转移酶(GST)测定试剂盒/微量法/96S 新品

谷胱甘肽S-转移酶(GST)测定试剂盒/微量法/96S

测定意义：

GST 是一种具有多种生理功能的蛋白质家族，主要存在于细胞质内。GST 是体内解毒酶系统的重要组成部分，主要催化各种化学物质及其代谢产物与 GSH 的巯基共价结合，使亲电化合物变为亲水物质，易于从胆汁或尿液中排泄，达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。因此，GST 在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。此外，因为 GST 具有 GSH-Px 活性，亦称为 non-Se GSH-Px ，具有修复氧化破坏的大分子如 DNA、蛋白质等的功能。注意，GST 催化的反应减少GSH 含量，但是不增加 GSSG 含量。

测定原理：

GST 催化 GSH 与 CDNB 结合，其结合产物的光吸收峰波长为 340nm；通过测定 340nm 波长处吸光度上升速率，即可计算出 GST 活性。

自备仪器和用品：

低温离心机、水浴锅、可调节移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、和蒸馏水。

测定：

1、分光光度计/酶标仪预热 30 min ，调节波长到 340 nm，用蒸馏水调零。

2、试剂三放在 25℃（一般物种）或者 37℃（哺乳动物）保温。

3、测定管：取微量石英比色皿或 96 孔板，加入 20μL 上清液，180μL 试剂二和 20μL 试剂三，迅速混匀后于 340nm 测定吸光度变化，记录 10 s 和 310 s 吸光度为 A1 和 A2。

注 意：

正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。