登革病毒Ⅱ型检测试剂盒
试剂简介:
登革病毒Ⅱ型检测试剂盒是一种用于检测登革病毒Ⅱ型核酸的分子诊断工具,通常采用实时荧光定量PCR技术,具有高灵敏度、高特异性和快速检测的特点。
技术原理与核心参数
产品名称 | 登革病毒Ⅱ型检测试剂盒 | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1476 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
技术原理:
该试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术,针对登革病毒Ⅱ型的保守基因序列设计特异性引物和荧光探针,通过体外扩增检测病毒核酸。
探针的5'端标记荧光报告基团(如FAM),3'端标记淬灭基团(如TAMRA),在PCR扩增过程中,Taq酶的5'→3'外切酶活性将探针降解,释放荧光信号
,通过实时监测荧光强度变化来检测病毒核酸。
产品特点
高灵敏度:可检测低病毒载量样本,灵敏度优于传统方法。
高特异性:引物和探针针对DENV-2保守区设计,避免与其他病毒交叉反应。
快速高效:整个检测过程约1.5-2小时,适合快速诊断。
自动化兼容:适配主流荧光定量PCR仪,支持高通量检测。
操作流程
实验分区要求:
试剂准备区
样本处理区
扩增及产物分析区
具体步骤:
样本采集与处理:
采集疑似感染病人的静脉血2mL至EDTA抗凝管。
离心分离血清或血浆,提取病毒RNA,操作需在冰上进行以避免核酸降解。
试剂准备:
从-20℃取出试剂盒,融化并混匀组分。
配制PCR反应液:按比例混合缓冲液、dNTPs、引物、探针和逆转录酶/聚合酶。
加样与扩增:
在PCR反应管中加入处理好的样本RNA或对照品(5μL/管),终体积25μL。
设置PCR程序:50℃反转录30分钟;95℃预变性15分钟,然后45个循环(94℃ 15秒,58℃ 45秒),实时采集FAM通道荧光信号。
结果分析:
通过Ct值(循环阈值)判断样本是否为阳性,Ct值越小表示病毒载量越高。
阳性对照应出现典型扩增曲线,阴性对照应无扩增或Ct值大于。
注意事项
分区操作:严格在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区独立操作,避免交叉污染。
质量控制:每批检测需设阳性/阴性对照;核酸提取质量需通过分光光度计检测确认。
安全处理:废弃物需灭菌后丢弃,避免开盖防止气溶胶污染。
公司正在出售的产品:
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