登革病毒Ⅰ型 / 登革病毒Ⅱ型检测试剂盒( 双重荧光 PCR 法 )
试剂简介:
登革病毒Ⅰ型/Ⅱ型检测试剂盒(双重荧光PCR法)是一种用于同时检测和区分登革病毒Ⅰ型(DENV-1)和Ⅱ型(DENV-2)的分子诊断工具。
产品名称 | 登革病毒Ⅰ型 / 登革病毒Ⅱ型检测试剂盒( 双重荧光 PCR 法 ) | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1478 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
产品原理与靶标
基于实时荧光定量PCR技术,针对登革病毒Ⅰ型和Ⅱ型基因组中保守且具有型特异性的区域(如C基因、prM基因或NS5基因)设计两套特异性引物和TaqMan探针,
每套探针标记不同荧光基团(如FAM用于DENV-1,VIC用于DENV-2)。通过荧光信号实时监测PCR扩增过程,实现对DENV-1和DENV-2 RNA的同时检测与区分。
核心性能参数
检测范围:适用于人血清、血浆、全血等临床样本,也可用于蚊虫样本检测。
灵敏度:可检测低至10^2 - 10^3 copies/mL的病毒载量。
特异性:针对DENV-1和DENV-2分别设计引物探针,避免与其他血清型(DENV-3/4)或相关病毒交叉反应。
保存条件:通常在2-8℃避光保存,运输过程中需避免反复冻融。
操作流程
样本采集与处理:采集患者血液样本,分离血清或血浆,尽快进行核酸提取。
核酸提取:使用商业化病毒RNA提取试剂盒,按照说明书提取样本中的总RNA。
PCR反应体系配制:将提取的RNA模板加入试剂盒提供的PCR反应液中,分别加入DENV-1和DENV-2的荧光探针、逆转录酶和Taq聚合酶,混匀后短暂离心。
上机检测:设置实时荧光PCR仪程序(逆转录、预变性、扩增、熔解曲线分析),运行时间约1.5-2小时。
结果判读标准
阳性:样本出现特异性扩增曲线,相应荧光信号强度超过阈值,Ct值小于设定值(通常为35-40)。根据荧光基团类型(FAM或VIC)判断具体型别。
阴性:无扩增曲线或Ct值大于阈:值。
质控要求:阴性质控和阳性质控需同时满足要求,否则实验无效。
产品特点
双重检测:同时检测和区分DENV-1和DENV-2,提高检测效率。
高灵敏度与特异性:能够检测低病毒载量样本,特异性识别DENV-1和DENV-2,减少假阳性。
快速高效:全程检测时间1-2小时(含核酸提取),效率显著高于传统方法。
自动化兼容:适配主流荧光PCR仪,支持高通量检测,适合大规模筛查。
操作简便:部分试剂盒采用一体化设计,减少人工操作步骤,降低污染风险。
注意事项
污染防控:实验分区操作,避免样本交叉污染。
试剂处理:使用前恢复至室温,避免反复冻融。
适用范围:确认试剂盒用途(科研或诊断级),临床应用需符合相关法规要求。
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关键字: 登革病毒Ⅰ型;检测试剂盒;双重PCR-荧光法;
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